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基因工程是新品種花卉培育中的一種重要技術(shù)手段。研究發(fā)現(xiàn)普通矮牽?；ㄒ蛉狈λ{(lán)色色素合成所需的轉(zhuǎn)座酶而不能開藍(lán)色花，因此研究人員嘗試將從薔薇花瓣細(xì)胞中分離提取的轉(zhuǎn)座酶F35H基因轉(zhuǎn)入普通的矮牽牛中，以期獲得藍(lán)色矮牽牛新品種，該過程所用的質(zhì)粒與含轉(zhuǎn)座酶F35H基因的DNA片段上相關(guān)限制酶的酶切位點分別如圖1、圖2所示。限制性內(nèi)切核酸酶BamHⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ識別的堿基序列和酶切位點分別為G↓GATCC、↓GATC、A↓AGCTT。
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請回答下列問題：
（1）質(zhì)粒是獨立于
真核細(xì)胞的細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核
真核細(xì)胞的細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核
之外，具有自我復(fù)制能力的環(huán)狀雙鏈DNA分子，圖1質(zhì)粒中沒有顯示的結(jié)構(gòu)是
復(fù)制原點
復(fù)制原點
，啟動子的功能是
啟動轉(zhuǎn)錄，是RNA聚合酶結(jié)合的部位
啟動轉(zhuǎn)錄，是RNA聚合酶結(jié)合的部位
。
（2）若用只用HindⅢ切割含目的基因的DNA片段，有可能會帶來的不良影響是
自身環(huán)化，不利于與質(zhì)粒連接；目的基因與質(zhì)粒反向連接
自身環(huán)化，不利于與質(zhì)粒連接；目的基因與質(zhì)粒反向連接
。在用圖中質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座酶F35H基因構(gòu)建基因表達(dá)載體時，最好選用
HindⅢ和Sau3AⅠ
HindⅢ和Sau3AⅠ
限制酶來切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，理由是
質(zhì)粒和目的基因都有這兩種限制酶識別位點，并且切割后產(chǎn)生的黏性末端不同，不會出現(xiàn)自身環(huán)化現(xiàn)象，有利于質(zhì)粒和目的基因結(jié)合
質(zhì)粒和目的基因都有這兩種限制酶識別位點，并且切割后產(chǎn)生的黏性末端不同，不會出現(xiàn)自身環(huán)化現(xiàn)象，有利于質(zhì)粒和目的基因結(jié)合
。
（3）將構(gòu)建好的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入土壤農(nóng)桿菌，最終成功導(dǎo)入藍(lán)色素基因的農(nóng)桿菌，在含氨芐青霉素培養(yǎng)基、含四環(huán)素培養(yǎng)基、同時含氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基上的生存狀況應(yīng)該是
能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存，但是不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基和同時含兩種抗生素的培養(yǎng)基上生存
能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存，但是不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基和同時含兩種抗生素的培養(yǎng)基上生存
。

【答案】真核細(xì)胞的細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核；復(fù)制原點；啟動轉(zhuǎn)錄，是RNA聚合酶結(jié)合的部位；自身環(huán)化，不利于與質(zhì)粒連接；目的基因與質(zhì)粒反向連接；HindⅢ和Sau3AⅠ；質(zhì)粒和目的基因都有這兩種限制酶識別位點，并且切割后產(chǎn)生的黏性末端不同，不會出現(xiàn)自身環(huán)化現(xiàn)象，有利于質(zhì)粒和目的基因結(jié)合；能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存，但是不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基和同時含兩種抗生素的培養(yǎng)基上生存
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：14引用：1難度：0.6
相似題

  • 1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　　）
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    發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

  • 2．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng)，嚴(yán)重時甚至危及生命，因此必須對食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)?；a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達(dá)。
    （1）通過上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是
     
    （填寫下列編號）。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?；a(chǎn)目標(biāo)蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
    ⑤目的基因和運載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
    （2）在PCR過程中，引物的功能是
     
    。
    A．啟動DNA復(fù)制
    B．規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
    C．解旋DNA雙鏈
    D．充當(dāng)復(fù)制模板
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    （3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設(shè)計的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     
    。
    （4）獲取目的基因后，需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    （填DNA或RNA/DNA或RNA）。
    （5）在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中，溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    （6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用
     
    和
     
    切開，才能與MCO片段高效連接。
    （7）下列實驗操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
    B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
    C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進(jìn)行PCR檢測
    D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5

  • 3．用限制酶EcoRⅤ單獨切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個堿基對）的長鏈，而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長度的DNA片段，見圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端）。
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    若用MboⅠ限制酶單獨切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段的長度為（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/11/14 4:0:2組卷：89引用：9難度：0.7
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