回答下列有關(guān)遺傳信息傳遞與表達(dá)的問題.
pIJ702是一種常用質(zhì)粒(如圖),其中tsr為硫鏈絲菌素(一種抗生素)抗性基因,mel是黑色素合成基因,其表達(dá)能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落;而限制酶ClaⅠ、BglⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在pIJ702上分別只有一處識別序列.
(1)質(zhì)粒DNA分子中的兩條鏈靠
氫
氫
鍵維系成雙鏈結(jié)構(gòu).
(2)以SacⅠ和SphⅠ切取的目的基因置換pIJ702上0.4kb(1kb=1000對堿基)的SacⅠ/SphⅠ片段,構(gòu)成重組質(zhì)粒pZHZ8.上述兩種質(zhì)粒的限制酶酶切片段長度列在表1中.由此判斷目的基因內(nèi)部是否含有BglⅡ切割位點(diǎn),并說明判斷依據(jù)含有,據(jù)表4和題意,pIJ702上原有的一個(gè)BglⅡ位點(diǎn)被目的基因置換后,pZHZ8仍被BglⅡ切為線狀,故目的基因中必然含有一個(gè)BglⅡ位點(diǎn).
含有,據(jù)表4和題意,pIJ702上原有的一個(gè)BglⅡ位點(diǎn)被目的基因置換后,pZHZ8仍被BglⅡ切為線狀,故目的基因中必然含有一個(gè)BglⅡ位點(diǎn).
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(3)已知pIJ702上含mel基因的ClaⅠ/PstⅠ區(qū)域長度為2.5kb,若用ClaⅠ和PstⅠ聯(lián)合酶切pZHZ8,則參照表1數(shù)據(jù)可斷定酶切產(chǎn)物中最小片段的長度為0.3
0.3
kb. 表1 |
| pIJ702 | pZHZ8 |
BglⅡ | 5.7kb | 6.7kb |
ClaⅠ | 5.7kb | 2.2kb,4.5kb |
PstⅠ | 5.7kb | 1.6kb,5.1kb |
(3)不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素固體培養(yǎng)基上的生長狀況如表2所示.若要篩選接納了pIJ702或pZHZ8的鏈霉菌細(xì)胞,所需的硫鏈絲菌素最小濃度應(yīng)為
5
5
μg/mL(填寫表格中給定濃度);含有重組質(zhì)粒pZHZ8的菌落呈
白
白
色.
表2
固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度(μg/mL) | 0 | 1 | 2 | 5 | 10 |
不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長狀況 | +++++ | +++ | + | - | - |
“+”表示生長;“-”表示不長 |
(4)上述目的基因來源于原核生物,其蛋白質(zhì)編碼序列(即編碼從起始密碼子到終止密碼子之間的序列)經(jīng)測定為1256對堿基,試判斷對這段序列的測定是否存在錯(cuò)誤:
錯(cuò)誤
錯(cuò)誤
,并說明依據(jù)
因?yàn)樵松餂Q定每個(gè)氨基酸的堿基序列為三聯(lián)密碼,所以基因的編碼堿基序列應(yīng)為3的整數(shù)倍
因?yàn)樵松餂Q定每個(gè)氨基酸的堿基序列為三聯(lián)密碼,所以基因的編碼堿基序列應(yīng)為3的整數(shù)倍
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