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“實(shí)時(shí)熒光定量qPCR”是新冠疫情防控的一把利刃,通常在1~2h內(nèi)即可得到檢測結(jié)果。TaqMan探針是實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR技術(shù)中一種常用探針(如圖1),其5′端連接熒光基團(tuán)(R),3′端連接淬滅劑(Q)。當(dāng)探針完整時(shí),R發(fā)出的熒光信號被Q吸收而不發(fā)熒光。在PCR擴(kuò)增過程中,當(dāng)TaqDNA聚合酶遇到探針時(shí)會使探針?biāo)舛尫懦鲇坞x的R和Q,R發(fā)出的熒光信號被相應(yīng)儀器檢測到,熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物數(shù)量完全同步(如圖2)。請據(jù)圖回答:
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(1)結(jié)合圖1和圖2分析,“熒光RT-PCR技術(shù)”所用的試劑盒中通常都應(yīng)該含有
逆(反)轉(zhuǎn)錄
逆(反)轉(zhuǎn)錄
酶、
Taq
Taq
酶、TaqMan探針、引物、dNTP、Mg2+、緩沖劑等。這種分子層面的熒光RT-PCR檢測具有特異性和靈敏性都很高的特點(diǎn),主要與試劑盒中的
引物
引物
、
TaqMan探針
TaqMan探針
有關(guān)。
(2)根據(jù)TaqMan探針功能分析,探針中堿基序列的設(shè)計(jì)應(yīng)主要依據(jù)
新冠病毒RNA內(nèi)部的一段序列(新冠病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄形成的DNA的部分序列)
新冠病毒RNA內(nèi)部的一段序列(新冠病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄形成的DNA的部分序列)
。新冠病毒(2019-nCoV)是冠狀病毒大家庭中的新的一員,其堿基序列與引起SARS的冠狀病毒堿基序列有79.5%的相似性,與流感病毒堿基相似度也較高,因此在設(shè)計(jì)TaqMan探針時(shí)應(yīng)篩選出2019-nCoV特有序列,以避免
假陽性
假陽性
(填“假陰性”或“假陽性”)的出現(xiàn)。
(3)根據(jù)圖1和圖2,Taq DNA聚合酶除了能催化DNA子鏈的延伸,還能
催化RNA(TaqMan探針)的水解
催化RNA(TaqMan探針)的水解
。
(4)IgM和IgG均屬于免疫球蛋白家族,是機(jī)體在抗原物質(zhì)刺激下由漿細(xì)胞產(chǎn)生的抗體。IgM/IgG檢測試劑盒的原理是
抗原抗體特異性結(jié)合
抗原抗體特異性結(jié)合
,通過檢測人體內(nèi)相應(yīng)抗體間接證明是否感染。被病毒感染后,機(jī)體會產(chǎn)生一系列的變化來抵御這種入侵,其中IgM和IgG的含量會發(fā)生如圖3所示變化。
通過對COVID-19患者研究發(fā)現(xiàn),病毒侵入人體后,大約需要5~7天產(chǎn)生IgM抗體,IgG抗體在感染后10~15天時(shí)產(chǎn)生。通過檢測外周血中IgM和IgG,不僅可以鑒別是否感染,還可以辨別檢測者是近期感染或者是既往感染。當(dāng)核酸檢測結(jié)果為陽性,IgM(+)IgG(-)時(shí),可判斷檢測者為
近期感染
近期感染
;已治愈的患者檢測結(jié)果應(yīng)為
核酸檢測結(jié)果為陰性,IgM (-) IgG (+)
核酸檢測結(jié)果為陰性,IgM (-) IgG (+)

【答案】逆(反)轉(zhuǎn)錄;Taq;引物;TaqMan探針;新冠病毒RNA內(nèi)部的一段序列(新冠病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄形成的DNA的部分序列);假陽性;催化RNA(TaqMan探針)的水解;抗原抗體特異性結(jié)合;近期感染;核酸檢測結(jié)果為陰性,IgM (-) IgG (+)
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:22引用:1難度:0.6
相似題
  • 1.中國科學(xué)家采集了某深海海域的沉積物樣品,分離、鑒定得到其中的深海放線菌,以期獲得具有前景的抗生素替代品。據(jù)此回答下列問題:
    (1)研究人員欲篩選出深海放線菌進(jìn)行研究,取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng),稀釋后取菌液通過
     
    法接種到高氏一號(加數(shù)滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的酚)培養(yǎng)基表面以獲得
     
    。培養(yǎng)基中的酚能抑制細(xì)菌等雜菌的生長,而放線菌能在該培養(yǎng)基上正常生長,這種培養(yǎng)基屬于
     
    培養(yǎng)基。
    (2)通過PCR技術(shù)擴(kuò)增分離得到的放線菌的16SrRNA基因可進(jìn)行菌株的種屬鑒定。PCR技術(shù)中起關(guān)鍵作用的酶是
     
    ,在PCR反應(yīng)緩沖液中通常要加入
     
    ,以激活該酶。
    (3)PCR能在放線菌總的DNA中專一性擴(kuò)增出16SrRNA基因的原因是
     
    。PCR的產(chǎn)物一般可通過
     
    鑒定。

    發(fā)布:2024/11/18 2:30:1組卷:3引用:2難度:0.5
  • 2.新型冠狀病毒的檢測方法目前主要有核酸檢測和抗體檢測?,F(xiàn)在的病毒核酸檢測試劑盒,多數(shù)采用熒光定量PCR方法。檢測原理就是以病毒獨(dú)特的基因序列為檢測靶標(biāo),通過PCR擴(kuò)增,使我們選擇的這段靶標(biāo)DNA序列指數(shù)級增加,每一個擴(kuò)增出來的DNA序列,都可與我們預(yù)先加入的一段熒光標(biāo)記探針結(jié)合,產(chǎn)生熒光信號,擴(kuò)增出來的靶基因越多,累積的熒光信號就越強(qiáng)。而沒有病毒的樣本中,由于沒有靶基因擴(kuò)增,因此就檢測不到熒光信號增強(qiáng)。下列說法錯誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/15 12:0:1組卷:14引用:4難度:0.7
  • 3.PCR技術(shù)是對體內(nèi)DNA復(fù)制過程的模仿,在基因診斷等許多方面發(fā)揮重要作用。其機(jī)理模式如圖所示,①②③表示DNA上的相關(guān)區(qū)段,abcd分別為引物的兩端。現(xiàn)利用該技術(shù)擴(kuò)增片段②,下列描述中正確的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)?

    發(fā)布:2024/11/17 22:30:1組卷:9引用:1難度:0.7
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