安莎霉素是一類主要由來源于海洋的稀有放線菌產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物,具有較高的抗菌活性和藥用價(jià)值??蒲腥藛T通常從深海采集淤泥樣本,再分離、純化并篩選出產(chǎn)安莎霉素的放線菌,其分離培養(yǎng)流程如圖。請(qǐng)分析回答下列問題:
(1)過程①的接種方法為 稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法。
(2)統(tǒng)計(jì)菌落種類和數(shù)量時(shí)要每隔24h觀察統(tǒng)計(jì)一次,直到各類菌落數(shù)目穩(wěn)定,以防止培養(yǎng)時(shí)間不足導(dǎo)致 遺漏菌落的種類和數(shù)目遺漏菌落的種類和數(shù)目。
(3)研究人員發(fā)現(xiàn)產(chǎn)安莎霉素的放線菌具有一個(gè)普遍的共性--氨基酸缺陷型。從篩選目的分析,基本培養(yǎng)基與完全培養(yǎng)基存在差異的成分是 氨基酸氨基酸。為了初步鑒定營(yíng)養(yǎng)缺陷型放線菌菌株,科研人員進(jìn)行了如下操作:
①用接種針挑取 菌落A菌落A(填“菌落A”或“菌落B”)接種于盛有完全液體培養(yǎng)的離心管中,28℃振蕩培養(yǎng)3~5天后,離心取沉淀物,用無菌水洗滌3次制成菌懸液。
②吸取1mL菌懸液加入無菌培養(yǎng)皿中,傾注15mL融化開冷卻至50℃左右的基本培養(yǎng)基,待其冷凝后用記號(hào)筆在皿底劃分五個(gè)區(qū)域,標(biāo)記A、B、C、D、E。
③在劃分的五個(gè)區(qū)域上放入少量分組的氨基酸粉末(如下表所示),經(jīng)培養(yǎng)后,觀察生長(zhǎng)圈出現(xiàn)的區(qū)域,從而確定屬于何種氨基酸缺陷型。
組別 | 所含氨基酸 | ||||
A | 組氨酸 | 蘇氨酸 | 谷氨酸 | 賴氨酸 | 亮氨酸 |
B | 精氨酸 | 天冬氨酸 | 賴氨酸 | 甲硫氨酸 | 苯丙氨酸 |
C | 酪氨酸 | 谷氨酸 | 賴氨酸 | 色氨酸 | 丙氨酸 |
D | 甘氨酸 | 天冬氨酸 | 蘇氨酸 | 色氨酸 | 絲氨酸 |
E | 半胱氨酸 | 亮氨酸 | 苯丙氨酸 | 丙氨酸 | 絲氨酸 |
蘇氨酸
蘇氨酸
缺陷型。(4)科研人員分離、純化出產(chǎn)安莎霉素的放線菌后,需要利用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增其DNA上的16SrRNA保守片段,然后通過DNA序列比對(duì)進(jìn)行菌種親源關(guān)系的鑒定。查找數(shù)據(jù)庫發(fā)現(xiàn)該放線菌的16SrRNA目的基因片段及相應(yīng)限制酶識(shí)別序列如圖所示:
限制酶 | EcoRⅠ | BamHⅠ | HindⅢ | SacⅠ |
識(shí)別序列和切割位點(diǎn) | G↓AATTCG | G↓ATCC | A↓AGCTT | GAGCT↓C |
EcoRⅠ、SacⅠ
EcoRⅠ、SacⅠ
。得到目的基因以后就可以利用PCR技術(shù)對(duì)16SrRNA進(jìn)行體外擴(kuò)增,擴(kuò)增目的基因的原理是 DNA半保留復(fù)制
DNA半保留復(fù)制
,此過程需要加入 熱穩(wěn)定DNA聚合酶
熱穩(wěn)定DNA聚合酶
催化。【答案】稀釋涂布平板法;遺漏菌落的種類和數(shù)目;氨基酸;菌落A;蘇氨酸;EcoRⅠ、SacⅠ;DNA半保留復(fù)制;熱穩(wěn)定DNA聚合酶
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:16引用:2難度:0.7
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1.回答下列關(guān)于微生物的問題.
阿拉伯膠是一種多糖,研究者從某地合歡樹下距離地表深10~15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01,以下為該菌株的鑒定過程.
(1)為獲得單菌落,可采用平板劃線法或
A.細(xì)胞膜 B.核糖體 C.?dāng)M核 D.莢膜
(2)表中培養(yǎng)液pH均為6.0,若對(duì)SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進(jìn)行測(cè)定,則應(yīng)選用表中的
①缺少
②具有
③缺乏
表 試驗(yàn)用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發(fā)布:2025/1/2 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.5 -
2.丙草胺(C15H22ClNO2)是一種廣泛應(yīng)用的除草劑,能抑制土壤細(xì)菌、放線菌和真菌的生長(zhǎng)。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株,并對(duì)其計(jì)數(shù)(如圖所示),以期為修復(fù)污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/31 4:0:1組卷:17引用:3難度:0.7 -
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