三葉青為蔓生的藤本植物,以根入藥。由于野生三葉青對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境要求非常苛刻,以及生態(tài)環(huán)境的破壞和過(guò)度的采挖,目前我國(guó)野生三葉青已十分珍稀。
(1)為保護(hù)三葉青的
遺傳
遺傳
多樣性和保證藥材的品質(zhì),科技工作者依據(jù)生態(tài)工程原理,利用
間種
間種
技術(shù),實(shí)現(xiàn)了三葉青的林下種植。
(2)依據(jù)基因工程原理,利用發(fā)根農(nóng)桿菌侵染三葉青帶傷口的葉片,葉片產(chǎn)生酚類化合物,誘導(dǎo)發(fā)根農(nóng)桿菌質(zhì)粒上vir系列基因表達(dá)形成
DNA聚合酶
DNA聚合酶
和限制性核酸內(nèi)切酶等,進(jìn)而從質(zhì)粒上復(fù)制并切割出一段可轉(zhuǎn)移的DNA片段(T-DNA)。T-DNA進(jìn)入葉片細(xì)胞并整合到染色體上,T-DNA上rol系列基因表達(dá),產(chǎn)生相應(yīng)的植物激素,促使葉片細(xì)胞持續(xù)不斷地分裂形成
愈傷組織
愈傷組織
,再分化形成毛狀根。
(3)剪取毛狀根,轉(zhuǎn)入含頭孢類抗生素的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行多次
繼代
繼代
培養(yǎng),培養(yǎng)基中添加抗生素的主要目的是
殺滅發(fā)根農(nóng)桿菌
殺滅發(fā)根農(nóng)桿菌
。最后取毛狀根轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基、置于搖床上進(jìn)行懸浮培養(yǎng),通過(guò)控制搖床的
轉(zhuǎn)速
轉(zhuǎn)速
和溫度,調(diào)節(jié)培養(yǎng)基成分中的
營(yíng)養(yǎng)元素以及生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的種類和濃度
營(yíng)養(yǎng)元素以及生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的種類和濃度
,獲得大量毛狀根,用于提取藥用成分。