普通PCR在擴(kuò)增DNA的過程中存在一定概率的堿基錯(cuò)誤配對(duì)，得到部分的錯(cuò)誤產(chǎn)物。巢式PCR是一種在普通PCR基礎(chǔ)上改良的新型PCR技術(shù)，擴(kuò)增的精確性比普通PCR更高。巢式PCR對(duì)目標(biāo)DNA進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)需要用到兩對(duì)不同的引物，首先使用第一對(duì)引物（外引物）對(duì)目標(biāo)DNA進(jìn)行第一次擴(kuò)增得到中間產(chǎn)物，然后使用第二對(duì)引物（內(nèi)引物）對(duì)中間產(chǎn)物進(jìn)行第二次擴(kuò)增得到目標(biāo)產(chǎn)物，過程如圖所示。請(qǐng)回答相關(guān)問題：
（1）PCR的原理是 DNA的復(fù)制DNA的復(fù)制，PCR反應(yīng)體系一般都需要加入一定量的，其作用是 激活DNA聚合酶激活DNA聚合酶。
（2）巢式PCR通常在第一支試管中進(jìn)行第一次擴(kuò)增，然后把得到的中間產(chǎn)物分離出來轉(zhuǎn)移到另外一支試管中進(jìn)行第二次擴(kuò)增反應(yīng)，兩次擴(kuò)增不在同一支試管中擴(kuò)增的原因是 防止內(nèi)引物直接參與第一次的擴(kuò)增，無法實(shí)現(xiàn)巢式PCR高精確性擴(kuò)增的目的防止內(nèi)引物直接參與第一次的擴(kuò)增，無法實(shí)現(xiàn)巢式PCR高精確性擴(kuò)增的目的。使用瓊脂糖凝膠電泳對(duì)模板DNA與中間產(chǎn)物分離時(shí)，由于中間產(chǎn)物的分子量較小，所以相同時(shí)間內(nèi)在凝膠中的遷移距離更 大大。
（3）如果巢式PCR第一次擴(kuò)增得到的某中間產(chǎn)物的部分堿基發(fā)生了替換，則第二次擴(kuò)增時(shí)內(nèi)引物與該中間產(chǎn)物配對(duì)并擴(kuò)增的概率 降低降低。如果想進(jìn)一步減少錯(cuò)誤目標(biāo)產(chǎn)物的產(chǎn)生，還可以適當(dāng) 提高提高（填“提高”或“降低”）復(fù)性的溫度。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定．
【答案】DNA的復(fù)制；激活DNA聚合酶；防止內(nèi)引物直接參與第一次的擴(kuò)增，無法實(shí)現(xiàn)巢式PCR高精確性擴(kuò)增的目的；大；降低；提高
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：6引用：2難度：0.5
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對(duì)定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?img alt src="http://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
2．科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對(duì)CO2的親和力，利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請(qǐng)回答下列問題：
（1）PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）?？衫枚c(diǎn)突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體，常用將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，還需用到植物細(xì)胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，若將一個(gè)目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入個(gè)引物。
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為?？蒲腥藛T通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中，經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測(cè)外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
C．人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá)，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植（克?。?，可以獲得多個(gè)具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯(cuò)誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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