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酶的改造
利用天然DszC酶可獲得低硫石油,減少酸雨,但從紅球菌獲得的天然DszC酶的活性會(huì)受到產(chǎn)物的抑制,為此研究者對DSzC酶進(jìn)行改造,步驟如下:
步驟Ⅰ.將3種DszC突變基因用SpeⅠ和EcoRⅠ酶切后,分別與質(zhì)粒(圖1)連接。
步驟Ⅱ.將連接后的DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞,放入含有抗生素的培養(yǎng)基篩選成功導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞。
步驟Ⅲ.培養(yǎng)受體細(xì)胞,并檢測酶活和產(chǎn)物濃度的關(guān)系(圖2)。
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(1)在階段Ⅱ,培養(yǎng)基上發(fā)出綠色熒光的受體細(xì)胞中,一定含有的基因是
③④
③④
(用下列編號答題);階段Ⅱ篩選得到的受體細(xì)胞中,含有的基因是
②④
②④
(用下列編號答題)。
①天然DszC基因
②突變DszC基因
③綠色熒光基因
④抗性基因
(2)階段Ⅰ-Ⅲ,突變DSzC基因得到表達(dá)的階段是
Ⅱ、Ⅲ
Ⅱ、Ⅲ
(Ⅲ/Ⅱ/Ⅰ)。
(3)已知天然DSzC基因有1254個(gè)堿基對,結(jié)合圖2信息,從不同酶的活性和受產(chǎn)物抑制的程度,分析突變DSzC γ酶基因的長度是1257個(gè)堿基對還是303個(gè)堿基對?請寫出分析過程。
是303個(gè)堿基對。當(dāng)DSzCγ酶基因表達(dá)出的DSzCγ酶濃度升高,DSzCγ酶活性并未受到很大影響,而天然DSzC酶基因表達(dá)出的DSzC酶濃度升高,DSzC酶活性下降幅度很大,這說明突變后產(chǎn)生的DSzCγ酶受產(chǎn)物抑制作用小。說明DSzCγ酶與DSzC酶的結(jié)構(gòu)具有很大差異,對應(yīng)的二者的基因序列也會(huì)有較大差異
是303個(gè)堿基對。當(dāng)DSzCγ酶基因表達(dá)出的DSzCγ酶濃度升高,DSzCγ酶活性并未受到很大影響,而天然DSzC酶基因表達(dá)出的DSzC酶濃度升高,DSzC酶活性下降幅度很大,這說明突變后產(chǎn)生的DSzCγ酶受產(chǎn)物抑制作用小。說明DSzCγ酶與DSzC酶的結(jié)構(gòu)具有很大差異,對應(yīng)的二者的基因序列也會(huì)有較大差異
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】③④;②④;Ⅱ、Ⅲ;是303個(gè)堿基對。當(dāng)DSzCγ酶基因表達(dá)出的DSzCγ酶濃度升高,DSzCγ酶活性并未受到很大影響,而天然DSzC酶基因表達(dá)出的DSzC酶濃度升高,DSzC酶活性下降幅度很大,這說明突變后產(chǎn)生的DSzCγ酶受產(chǎn)物抑制作用小。說明DSzCγ酶與DSzC酶的結(jié)構(gòu)具有很大差異,對應(yīng)的二者的基因序列也會(huì)有較大差異
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:4引用:1難度:0.6
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    發(fā)布:2024/12/20 5:0:2組卷:35引用:5難度:0.6
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    (1)獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有
     
    (答出2項(xiàng))等。
    (2)為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒,應(yīng)該選擇
     
    (填酶)切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入
     
    (填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”)對目的基因進(jìn)行篩選。
    (3)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程
     
    (填序號)。過程②③采用的方法是
     
    。
    (4)⑤過程需要用到
     
    等植物激素,在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中,這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化,原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/12/20 2:30:1組卷:16引用:5難度:0.5
  • 3.如表為5種限制酶的識別序列及切割位點(diǎn),如圖為某種質(zhì)粒和目的基因,箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?,F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中,以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是( ?。?
    限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ
    識別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG
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    發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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