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同源重組是指發(fā)生在兩個DNA分子的同源序列（DNA序列相同或近似）之間直接進行交換的一種重組形式。利用同源重組的方法可以將目的基因插入到表達載體上，如圖1所示。該操作可通過PCR技術在任一位點實現(xiàn)質(zhì)粒的線性化，只要將目的基因兩端帶有與線性化質(zhì)粒兩端同源的DNA序列，在重組酶的作用下即可實現(xiàn)質(zhì)粒上的同源重組，被稱為體外重組。
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（1）真核生物有性生殖過程中發(fā)生在
同源染色體非姐妹染色單體
同源染色體非姐妹染色單體
之間的基因重組，為體外同源重組提供了依據(jù)。圖中B過程采用PCR技術擴增目的基因時，需要的正向引物和反向引物的序列中都由
線性化質(zhì)粒兩端同源的DNA序列和目的基因的部分序列
線性化質(zhì)粒兩端同源的DNA序列和目的基因的部分序列
兩部分組成。
（2）通常采用雙酶切法構(gòu)建目的基因表達載體的優(yōu)點是
保障目的基因和線性質(zhì)粒的正確連接（防止目的基因、線性質(zhì)粒的自身環(huán)化及目的基因與線性質(zhì)粒的反接）
保障目的基因和線性質(zhì)粒的正確連接（防止目的基因、線性質(zhì)粒的自身環(huán)化及目的基因與線性質(zhì)粒的反接）
。與雙酶切法相比，同源重組法構(gòu)建基因表達載體的突出優(yōu)點是
在重組酶的作用下可以實現(xiàn)載體上任一點與目的基因的重組
在重組酶的作用下可以實現(xiàn)載體上任一點與目的基因的重組
。
（3）表達質(zhì)粒線性化和目的基因擴增后電泳結(jié)果分別如圖2甲、乙所示，將獲得的目的基因與線性化質(zhì)?；旌蠈胧荏w細胞中，不添加重組酶，該過程稱為體內(nèi)重組。為檢測不同細胞的同源重組情況，一段時間后利用相應的引物對三個細胞（標號1、2、3）中DNA進行PCR擴增，電泳結(jié)果如圖2丙所示。根據(jù)電泳結(jié)果可說明
1號、2號細胞未實現(xiàn)同源重組，3號細胞實現(xiàn)了同源重組
1號、2號細胞未實現(xiàn)同源重組，3號細胞實現(xiàn)了同源重組
。

【答案】同源染色體非姐妹染色單體；線性化質(zhì)粒兩端同源的DNA序列和目的基因的部分序列；保障目的基因和線性質(zhì)粒的正確連接（防止目的基因、線性質(zhì)粒的自身環(huán)化及目的基因與線性質(zhì)粒的反接）；在重組酶的作用下可以實現(xiàn)載體上任一點與目的基因的重組；1號、2號細胞未實現(xiàn)同源重組，3號細胞實現(xiàn)了同源重組
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：22引用：1難度：0.6
相似題

  • 1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

  • 2．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應，嚴重時甚至危及生命，因此必須對食品中生物胺的含量進行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)?；a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達。
    （1）通過上述基因工程技術獲取目標產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是
     
    （填寫下列編號）。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)模化生產(chǎn)目標蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細胞
    ⑤目的基因和運載體重組構(gòu)建表達載體
    （2）在PCR過程中，引物的功能是
     
    。
    A．啟動DNA復制
    B．規(guī)定擴增區(qū)間
    C．解旋DNA雙鏈
    D．充當復制模板
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    （3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設計的PCR引物應為圖甲中的
     
    。
    （4）獲取目的基因后，需要和載體重組導入受體細胞。載體的化學本質(zhì)是
     
    （填DNA或RNA/DNA或RNA）。
    （5）在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應中，溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    （6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用
     
    和
     
    切開，才能與MCO片段高效連接。
    （7）下列實驗操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
    B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進行鑒別
    C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進行PCR檢測
    D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5

  • 3．用限制酶EcoRⅤ單獨切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個堿基對）的長鏈，而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長度的DNA片段，見圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端）。
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    若用MboⅠ限制酶單獨切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段的長度為（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/11/14 4:0:2組卷：89引用：9難度：0.7
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