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科研人員將酵母菌的海藻糖合成酶(TPS)基因轉(zhuǎn)入小麥中,以期獲得具備抗旱特性的小麥。圖1表示載體和預(yù)期基因表達載體的結(jié)構(gòu)(注:Bar基因是抗除草劑基因),圖2標注TPS基因的酶切位點以及引物結(jié)合的可能情況。
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(1)PCR技術(shù)中的引物可以使DNA聚合酶能夠從引物的
3'
3'
端開始連接脫氧核苷酸,本實驗可選擇的引物組合為
2、3
2、3
(用圖2中數(shù)字表示)。為了方便構(gòu)建重組質(zhì)粒,所用一對引物的一端需要分別加上
BamHⅠ、SacⅠ
BamHⅠ、SacⅠ
酶(填圖1中限制酶的名稱)的識別序列。
(2)基因表達載體轉(zhuǎn)入細胞后,在獲得的植株葉片上涂抹除草劑,共獲得7株待測個體?,F(xiàn)對篩選出的個體進行DNA水平的檢測。請?zhí)顚懕砀?,完成實驗?br />
組別 植株編號1-7 對照組1 對照組2
模板 1-7植株DNA
TPS基因(基因表達載體)
TPS基因(基因表達載體)
普通小麥DNA
PCR體系中其他物質(zhì) 緩沖液(添加Mg2+)、水、引物、4種脫氧核苷酸、②
耐高溫的DNA聚合(或Taq)
耐高溫的DNA聚合(或Taq)
電泳結(jié)果 編號1、2、4、5、7植株無條帶
編號3、6植株有條帶
有條帶
無條帶
無條帶
(3)基于上述實驗結(jié)果,
不能
不能
(填“能”或“不能”)判定編號3、6植株轉(zhuǎn)基因抗旱小麥研制成功,原因是
還需進行TPS含量的檢測(還需進行轉(zhuǎn)錄、翻譯等分子水平的檢測等)
還需進行TPS含量的檢測(還需進行轉(zhuǎn)錄、翻譯等分子水平的檢測等)

【答案】3';2、3;BamHⅠ、SacⅠ;TPS基因(基因表達載體);耐高溫的DNA聚合(或Taq);無條帶;不能;還需進行TPS含量的檢測(還需進行轉(zhuǎn)錄、翻譯等分子水平的檢測等)
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:4引用:1難度:0.6
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  • 1.以下是有關(guān)分離與鑒別DNA的技術(shù),其中說法正確的是(  )

    發(fā)布:2024/12/15 16:30:6組卷:5引用:1難度:0.5
  • 2.科研人員克隆了豬白細胞抗原基因(SLA-2基因),構(gòu)建了該基因的真核表達載體,進行了豬腎上皮細胞表達研究。實驗的主要流程如圖1,SLA-2基因長度為1100bp,質(zhì)粒B的總長度為4445bp,其限制酶切點后的數(shù)字表示距復制原點的距離。請回答:
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    限制酶 BclⅠ NotⅠ XbaⅠ San3AⅠ
    識別序列及切割位點 T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC
    (1)過程①中,PCR擴增SLA-2的原理是
     
    ,下列4種引物中應(yīng)選擇的是
     
    。
    a  5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
    b  5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
    c  5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
    d  5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
    (2)過程②將重組質(zhì)粒導入大腸桿菌的目的是
     
    ,該過程需要用
     
    處理大腸桿菌,使其成為感受態(tài)細胞。然后將大腸桿菌涂布在含有
     
    (抗生素)的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。
    (3)若用Sau3AⅠ和XbaⅠ完全酶切質(zhì)粒C后電泳,請在答題紙相應(yīng)位置畫出可能得到的電泳條帶。
    (4)科研中常用呤霉素對真核細胞進行篩選,一般選擇最低致死濃度的前一個濃度作為篩選濃度的原因是:既可以讓大部分沒有抗性的細胞死亡又不會讓
     
    。實驗結(jié)果如圖2,根據(jù)實驗結(jié)果最佳的嘌霉素篩選濃度為
     
    。
    (5)過程⑦研究人員用小鼠抗SLA抗原肽單克隆抗體檢測腎上皮細胞生產(chǎn)的抗原肽,其原理是
     
    ,單克隆抗體能檢測其是否具有正確的
     
    ,從而是否具有生物活性。
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    發(fā)布:2024/12/15 6:30:1組卷:41引用:3難度:0.6
  • 3.下列關(guān)于“DNA片段的擴增及電泳鑒定”的實驗,說法錯誤的是(  )

    發(fā)布:2024/12/15 6:30:1組卷:3引用:1難度:0.6
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