某研究性學(xué)習(xí)小組了解到泡菜中的乳酸菌除了在發(fā)酵中產(chǎn)生乳酸，還可以降解亞硝酸鹽，該小組利用泡菜液進(jìn)行了相關(guān)的研究。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）測(cè)定泡菜中亞硝酸鹽的含量可以用

比色

比色

法。其原理是：在鹽酸酸化的條件下，亞硝酸鹽與

對(duì)氨基苯磺酸

對(duì)氨基苯磺酸

發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成

玫瑰紅色染料

玫瑰紅色染料

，將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行目測(cè)比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。提取亞硝酸鹽的過(guò)程中，要加入氫氧化鋁，其作用是

吸附濾液中的色素等雜質(zhì)，使濾液澄清

吸附濾液中的色素等雜質(zhì)，使濾液澄清

。
（2）小組成員用改良的MRS固體培養(yǎng)基分離乳酸菌，該培養(yǎng)基成分如下：

蛋白胨	牛肉膏	酵母膏	葡萄糖	CaCO3	瓊脂	蒸餾水	其他成分略
10g	10g	10g	20g	20g	20g	1000mL

①該培養(yǎng)基從物理狀態(tài)分屬于

固體

固體

培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基中能作為氮源的物質(zhì)是

牛肉膏、蛋白胨、酵母膏

牛肉膏、蛋白胨、酵母膏

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②小組成員將泡菜液進(jìn)行梯度稀釋后，取0.1mL加入到50℃左右的培養(yǎng)基中搖勻，待凝固后，再在其上加蓋一層固體培養(yǎng)基。在50℃左右操作的原因是

此時(shí)培養(yǎng)基為液態(tài)且不燙手

此時(shí)培養(yǎng)基為液態(tài)且不燙手

，加蓋一層固體培養(yǎng)基的目的是

隔絕空氣（氧氣），確保無(wú)氧環(huán)境

隔絕空氣（氧氣），確保無(wú)氧環(huán)境

。
③該培養(yǎng)基因含碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣，從而在菌落周?chē)纬赏该鞯娜茆}圈。②中接種泡菜液的培養(yǎng)基在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h后，挑取溶鈣圈較大的菌落，用平板劃線法進(jìn)行進(jìn)一步純化。若下圖甲是純化培養(yǎng)后的菌落分布圖，對(duì)應(yīng)的平板劃線操作示意圖為

丙

丙

。

④乳酸菌菌種在-20℃的冷凍箱中長(zhǎng)期保存時(shí)，需要加入一定量的

甘油

甘油

。