下表中列出了幾種限制酶識別序列及其割位點(diǎn),圖一、圖二中箭頭表示相關(guān)限制酶的位點(diǎn).請回答下列問題:
限制酶 |
BamH I |
HindⅢ |
EcoR I |
Sma I |
識別序列及切割位點(diǎn) |
↓ GGATCC CCTAGG ↑ |
↓ AAGCTT TTCGAA ↑ |
↓ GAATTC CTTAAG ↑ |
↓ CCCGGG GGGCCC ↑ |
(1)一個圖一所示的質(zhì)粒分子經(jīng)Sma I切割前后,分別含有
0、2
0、2
個游離的磷酸基團(tuán).
(2)若對圖一中質(zhì)粒進(jìn)行改造,插入Sma I 酶切位點(diǎn)越多,質(zhì)粒的穩(wěn)定性越
高
高
.
(3)用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒,不能使用Sma I切割,原因是
SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因
SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因
.
(4)與只是用EcoR I 相比較,使用BamH I和HindⅢ兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止
質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化
質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化
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(5)為了獲取重組質(zhì)粒,將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合,并加入
DNA連接酶
DNA連接酶
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(6)重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了
鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞
鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞
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