基因X僅在水稻體細胞和精子中表達蛋白X，在卵細胞中不能轉錄。為研究基因 X表達對水稻卵細胞的影響，進行如下實驗：
（1）從水稻體細胞提取基因X的mRNA，首先需破碎細胞，經離心后獲得 細胞溶膠細胞溶膠，利用基因X的局部特定短序列做 DNA（基因）探針DNA（基因）探針，從中釣取相應mRNA經 逆轉錄逆轉錄后獲取目的基因。
（2）將基因X編碼序列與Luc基因（熒光素酶基因，熒光素酶能催化熒光素產生熒光）拼接成X-Luc融合基因（表達的蛋白質能保留兩種蛋白質各自的功能），并將融合基因插入到 Ti質粒Ti質粒的T-DNA中，利用 農桿菌轉化農桿菌轉化法將融合基因轉入水稻愈傷組織。
（3）經修飾處理的T-DNA上 啟動子（啟動部位）啟動子（啟動部位）可與卵細胞RNA聚合酶結合，從而在轉基因水稻卵細胞中能表達基因X。分離并培養(yǎng)轉基因水稻卵細胞，添加 熒光素熒光素即可篩選出成功表達基因X的卵細胞。
（4）水稻卵細胞在未受精時一般不進行發(fā)育，從轉基因植株未成熟種子中分離出胚，觀察到細胞內僅含一個染色體組，表明基因 X對水稻卵細胞的影響可能是 X基因表達能使卵細胞不經受精直接發(fā)育成胚X基因表達能使卵細胞不經受精直接發(fā)育成胚。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】細胞溶膠；DNA（基因）探針；逆轉錄；Ti質粒；農桿菌轉化；啟動子（啟動部位）；熒光素；X基因表達能使卵細胞不經受精直接發(fā)育成胚
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：3引用：1難度：0.7
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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