某研究人員利用轉基因技術改造乳酸桿菌，將其添加于飼料中，以提高家禽養(yǎng)殖效益。枯草芽孢桿菌可分泌一種可降解纖維素的酶，這種酶由W基因編碼。為在乳酸桿菌中表達W基因，需以圖1中質粒為載體將W基因導入乳酸桿菌，圖2為含W基因的DNA片段?；卮鹣铝袉栴}：
（1）采用PCR技術可以大量擴增W基因，該過程包括將W基因解鏈（變性）、引物與單鏈相應互補序列結合引物與單鏈相應互補序列結合（復性）和在 耐高溫的DNA聚合酶（或Taq酶）耐高溫的DNA聚合酶（或Taq酶）作用下合成互補子鏈（延伸）。
（2）不同生物的DNA能夠連接的原因是其分子結構相似、基本組成單位相同且均遵循 堿基互補配對堿基互補配對原則。將W基因與圖1所示的載體連接前應使用限制酶 EcoRI、HindⅢEcoRI、HindⅢ切割圖2中含W基因的DNA片段和載體，相對于單酶切，這種方法的優(yōu)點是 避免目的基因和載體的自身環(huán)化以及反向連接（合理即可）避免目的基因和載體的自身環(huán)化以及反向連接（合理即可）。
（3）所得重組質粒轉化乳酸桿菌后，使用含 氨芐青霉素氨芐青霉素的培養(yǎng)基篩選，以得到轉入W基因的乳酸桿菌。由于載體上的啟動子往往具有物種特異性，W基因上游的啟動子應選擇 乳酸桿菌乳酸桿菌（填“枯草芽孢桿菌”“乳酸桿菌”或“枯草芽孢桿菌或乳酸桿菌”）的啟動子。
（4）為確定只有導入重組質粒的乳酸桿菌才具有分解纖維素的能力，研究人員用液體培養(yǎng)基分別培養(yǎng)下表所示菌種，取培養(yǎng)液的上清液測定酶活力，實驗方案及測定結果如下表所示，表中的X應為 導入普通質粒的乳酸桿菌導入普通質粒的乳酸桿菌。
| 菌種 | 酶活性相對值 |
| 乳酸桿菌 | 未檢出 |
| X | 未檢出 |
| 導入了重組質粒的乳酸桿菌 | 0.96 |
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】引物與單鏈相應互補序列結合；耐高溫的DNA聚合酶（或Taq酶）；堿基互補配對；EcoRI、HindⅢ；避免目的基因和載體的自身環(huán)化以及反向連接（合理即可）；氨芐青霉素；乳酸桿菌；導入普通質粒的乳酸桿菌
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：24引用：1難度：0.5
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
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2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7