人乳鐵蛋白是一種重要的藥用保健蛋白。如圖表示利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人乳鐵蛋白的過程,圖中Tefx表示四環(huán)素抗性基因,Ampx表示氨芐青霉素抗性基因,五種限制酶的識別序列及切割位點(diǎn)如表所示,請回答以下問題:
限制酶 |
BamHⅠ |
HaeⅢ |
BclⅠ |
Sau3AⅠ |
NotⅠ |
識別序列 及切割位點(diǎn) |
|
|
|
|
|
(1)①過程常采用的方法是
顯微注射法
顯微注射法
。
(2)要將人乳鐵蛋白基因插入質(zhì)粒,若只允許使用一種限制酶,應(yīng)選擇的限制酶是
Sau3AⅠ
Sau3AⅠ
,構(gòu)建基因表達(dá)載體時,需要將人乳鐵蛋白基因嵌入到
啟動子和終止子
啟動子和終止子
之間,這樣人乳鐵蛋白基因才能在乳腺細(xì)胞中表達(dá)。
(3)據(jù)圖分析篩選含有重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞首先需要在含
氨芐青霉素
氨芐青霉素
(填“四環(huán)素”“氨芐青霉素”或“四環(huán)素或氨芐青霉素”)的培養(yǎng)基上進(jìn)行。
(4)若BamH I酶切的DNA末端與Bcl I酶切的DNA末端連接起來,連接部位的6個堿基對序列為
,對于該部位,這兩種酶
都不能
都不能
(填“都不能”或“只有一種能”)切開。
(5)培養(yǎng)出早期胚胎后,科學(xué)家欲進(jìn)行胚胎分割移植,則應(yīng)該選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的
桑葚胚或囊胚
桑葚胚或囊胚
,將其移入盛有操作液的培養(yǎng)皿中,然后用分割針進(jìn)行分割。