干擾素在人體中是由免疫細胞合成并分泌的一種糖蛋白,幾乎能抵御所有病毒引起的感染,傳統(tǒng)生產方法成本高、產量低,獲得的干擾素在體外不易保存。家蠶細胞具有高效表達外源基因的能力,將人干擾素基因導入家蠶細胞并大規(guī)模培養(yǎng),可以提取干擾素用于制藥.請回答相關問題:
(1)利用基因工程生產干擾素,過程是:
①從健康人體的外周靜脈血分離能合成干擾素的 免疫免疫細胞,從中提取mRNA,經 逆轉錄逆轉錄法獲取目的基因。
②用 限制限制酶處理載體和目的基因后,DNA連接酶處理,形成基因表達載體。為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達,需要把來自干擾素基因的片段正確插入表達載體的 啟動子啟動子和 終止子終止子之間。
③利用生物反應器培養(yǎng)家蠶細胞時,貼壁生長的細胞會產生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應器中,這樣可以 增大細胞貼壁生長的附著面積增大細胞貼壁生長的附著面積,增加培養(yǎng)的細胞數(shù)量,也有利于空氣交換。
④在檢驗干擾素基因是否已經導入家蠶細胞時,需要用到PCR技術。該PCR反應體系的主要成分應該包含:擴增緩沖液(含Mg2+)、水、4種脫氧核糖核苷酸、模板DNA、Taq酶Taq酶和 引物引物。
(2)利用蛋白質工程對干擾素進行改造,基本途徑是:預期蛋白質 功能功能→設計預期蛋白質 結構結構→推測氨基酸 序列序列→找到對應的脫氧核苷酸序列(基因)。
(3)利用細胞工程生產干擾素,設計思路是:將相應免疫細胞和瘤細胞融合,篩選出 雜交瘤細胞雜交瘤細胞,經細胞培養(yǎng)可獲得大量干擾素。
【考點】單克隆抗體及其應用.
【答案】免疫;逆轉錄;限制;啟動子;終止子;增大細胞貼壁生長的附著面積;Taq酶;引物;功能;結構;序列;雜交瘤細胞
【解答】
【點評】
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