科研工作者將TaNHX2基因轉(zhuǎn)移到某植物細(xì)胞內(nèi)，獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽植株新品種。如圖是獲取的含有目的基因的DNA片段，Sau3AI、EcoRI、BamHI三種限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列分別是↓GATC，G↓AATTC，G↓GATCC，質(zhì)粒上各有一個Sau3AI和EcoRI的酶切位點。請分析并回答下列問題：
（1）若用BamHI切割圖中所示的DNA片段獲得了目的基因，則選用限制酶Sau3AISau3AI切割質(zhì)粒，以便構(gòu)建重組質(zhì)粒，該方案的缺陷是會出現(xiàn)目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化以及目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定。故切割圖中所示的DNA片段的最佳方案是選用限制酶EcoRI和BamHIEcoRI和BamHI。
（2）實驗中酶作用的強(qiáng)弱可用酶活性來表示，通常，酶活性的高低可用單位時間內(nèi)單位體積中反應(yīng)物的消耗量或產(chǎn)物的增加量單位時間內(nèi)單位體積中反應(yīng)物的消耗量或產(chǎn)物的增加量來表示。
（3）若采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因（TaNHX2基因）導(dǎo)入原生質(zhì)體，請寫出主要操作流程：先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA中，然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA中，然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞。
原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇，其作用是維持一定的滲透壓，保持原生質(zhì)體的形態(tài)維持一定的滲透壓，保持原生質(zhì)體的形態(tài)。
（4）為了從個體水平檢測成果，需要進(jìn)行的操作是轉(zhuǎn)基因植株種植在鹽堿地，觀察其生長狀況轉(zhuǎn)基因植株種植在鹽堿地，觀察其生長狀況。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】Sau3AI；目的基因在質(zhì)粒上的連接方向不確定；EcoRI和BamHI；單位時間內(nèi)單位體積中反應(yīng)物的消耗量或產(chǎn)物的增加量；先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA中，然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞；維持一定的滲透壓，保持原生質(zhì)體的形態(tài)；轉(zhuǎn)基因植株種植在鹽堿地，觀察其生長狀況
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：30引用：3難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7