病菌感染首蓓，對(duì)首蓓的產(chǎn)量和品質(zhì)有很多的影響，研究人員將溶菌酶基因（LYZ基因）和綠色熒光蛋白基因（GFP基因）連接為LYZ一GFP基因，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將其導(dǎo)入到苜蓿中。本實(shí)驗(yàn)中使用圖1所示質(zhì)粒構(gòu)建載體，Vir區(qū)的基因產(chǎn)物是T一DNA整合到植物基因組中的必備條件，圖2表示含有LYZ一GFP基因的DNA片段。圖中箭頭表示相應(yīng)限制酶的酶切位點(diǎn)，酶級(jí)形成的末端均為私性末端，據(jù)圖回答問題：
（1）用PCR法對(duì)圖2所示基因片段進(jìn)行擴(kuò)增，并將產(chǎn)物用限制酶Ⅰ進(jìn)行切割，質(zhì)粒用同樣的限制酶切割，用DNA連接酶進(jìn)行連接。只考慮兩段不同DNA片段相連（不考慮自身的連接）的情況所得到的環(huán)狀DNA分子有 22種。
（2）本實(shí)驗(yàn)中的目的基因是 溶菌酶基因（或LYZ基因）溶菌酶基因（或LYZ基因），最佳的限制酶的選擇是 限制酶I、限制酶Ⅲ限制酶I、限制酶Ⅲ。在鑒別首蓓細(xì)胞中是否含有目的基因的時(shí)候，研究者可選擇的標(biāo)記基因有 卡那霉素抗性基因和綠色熒光蛋卡那霉素抗性基因和綠色熒光蛋。
（3）目的基因在體外擴(kuò)增時(shí)，與體內(nèi)復(fù)制的區(qū)別在于 體外擴(kuò)增過程不霱要解旋酶體外擴(kuò)增過程不霱要解旋酶。
（4）目的基因的表達(dá)產(chǎn)物在植物體中發(fā)揮作用時(shí) 不具有不具有（填“具有”或“不具有”）特異性。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】2；溶菌酶基因（或LYZ基因）；限制酶I、限制酶Ⅲ；卡那霉素抗性基因和綠色熒光蛋；體外擴(kuò)增過程不霱要解旋酶；不具有
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：4引用：2難度：0.7
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號(hào)）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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