基因工程可以按照人們的意愿賦予生物新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。圖甲是基因工程的基本操作流程，圖乙是定量PCR技術(shù)中的一種常用探針?；卮鹣铝袉栴}：

（1）圖甲中①過程所需的酶是

逆轉(zhuǎn)錄酶

逆轉(zhuǎn)錄酶

②過程所需的酶是

限制性核酸內(nèi)切酶（或限制酶）

限制性核酸內(nèi)切酶（或限制酶）

。
（2）圖甲中③過程需要借助PCR技術(shù)，該過程在TaqDNA聚合酶的作用下，DNA的合成方向總是從子鏈的

5'端

5'端

向

3'端

3'端

延伸。若利用PCR技術(shù)擴增目的基因的過程中消耗了126個引物分子，則該過程DNA擴增了

6

6

次。
（3）圖中⑤過程是

目的基因的檢測與鑒定

目的基因的檢測與鑒定

要檢測目的基因是否成功表達，首先從轉(zhuǎn)基因生物個體中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進行

抗原-抗體

抗原-抗體

雜交。
（4）圖乙的Taq-Man探針是定量PCR技術(shù)中的一種常用探針，其5'末端連接熒光基團（R），3′末端連接淬滅劑（Q）。當(dāng)探針完整時，R發(fā)出的熒光信號被Q吸收而不發(fā)熒光。在定量PCR擴增時，TaqDNA聚合酶在子鏈延伸過程中遇到與模板結(jié)合的探針，將探針切斷，使R遠離Q。隨PCR擴增次數(shù)的增加，熒光信號

（逐漸）增強

（逐漸）增強

（5）若圖甲④過程為將目的基因?qū)胫参锛毎?，最常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，該方法選擇Ti質(zhì)粒作為運載體的原因是

Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并整合到受體細胞的染色體的DNA上，以保證目的基因穩(wěn)定存在和表達

Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并整合到受體細胞的染色體的DNA上，以保證目的基因穩(wěn)定存在和表達

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