生長(zhǎng)激素在治療激素分泌過少的矮小癥方面有積極的作用，為了批量生產(chǎn)生長(zhǎng)激素，可以采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將控制生長(zhǎng)激素合成的基因轉(zhuǎn)移到微生物細(xì)胞內(nèi)。如表所示是涉及此轉(zhuǎn)基因技術(shù)的幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)；圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶對(duì)質(zhì)粒和供體DNA的切割位點(diǎn)，請(qǐng)回答下列問題：

限制酶	BamHⅠ	HindⅢ	ECORⅠ	SmaⅠ
識(shí)別序列及切割位點(diǎn)	↓ G GATCC CCTAG G ↑	↓ A AGCTT TTCGA A ↑	↓ G AATTC CTTAA G ↑	↓ CCC GGG GGG CCC ↑

（1）四種酶的識(shí)別序列相比較，

SmaⅠ

SmaⅠ

酶的識(shí)別序列的結(jié)構(gòu)相對(duì)穩(wěn)定，原因是

具有三個(gè)氫鍵的G—C堿基對(duì)含量高

具有三個(gè)氫鍵的G—C堿基對(duì)含量高

（從堿基種類含量角度分析）。
（2）為了提高構(gòu)建重組質(zhì)粒的成功率，你認(rèn)為最好先用

BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶

BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶

（填上表中酶的名稱）處理質(zhì)粒和目的基因，然后用

DNA連接

DNA連接

酶拼接。本題構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)絕對(duì)不能使用SmaⅠ的原因是

會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因

會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因

。
（3）為了檢測(cè)目的基因是否成功翻譯，可以用

抗原-抗體雜交

抗原-抗體雜交

技術(shù)，若沒有出現(xiàn)相應(yīng)的雜交帶，則可能需要用

帶有標(biāo)記的目的基因

帶有標(biāo)記的目的基因

做探針來檢測(cè)是否轉(zhuǎn)錄出mRNA。
（4）受體細(xì)胞最好是選擇

酵母菌等真核微生物

酵母菌等真核微生物

，以保證能夠從工程菌中直接得到具有生物學(xué)活性的人的生長(zhǎng)激素。受體細(xì)胞的另外一種選擇是制備“乳房生物反應(yīng)器”，即以

牛的受精卵

牛的受精卵

為受體細(xì)胞，進(jìn)而從奶牛的乳汁中提取人的生長(zhǎng)激素。工程菌相對(duì)于“乳房生物反應(yīng)器”的優(yōu)點(diǎn)是

繁殖速度快、外源基因表達(dá)效率高

繁殖速度快、外源基因表達(dá)效率高

。
（5）胰島素是人體內(nèi)唯一有降血糖功能的激素，采用蛋白質(zhì)工程可以對(duì)胰島素進(jìn)行改造，使之起效時(shí)間縮短，保證餐后血糖高峰和血液中胰島素高峰一致。如果你是科研工作者，請(qǐng)完善研制速效胰島素的思路：確定蛋白質(zhì)的

功能

功能

→蛋白質(zhì)應(yīng)有的高級(jí)結(jié)構(gòu)→蛋白質(zhì)應(yīng)具備的折疊狀態(tài)→

蛋白質(zhì)應(yīng)有的氨基酸序列

蛋白質(zhì)應(yīng)有的氨基酸序列

→相對(duì)應(yīng)的堿基序列。