平菇具有味道鮮美，抗雜菌污染的優(yōu)勢，杏鮑菇具有菌絲強(qiáng)壯，生長旺盛的優(yōu)勢。為獲得具有優(yōu)良性狀的平菇形菌株，研究者利用原生質(zhì)體融合技術(shù)，進(jìn)行了如下研究。
（1）以原生質(zhì)體融合技術(shù)培育雜種新菌株的典型優(yōu)勢是
打破生殖隔離，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種
打破生殖隔離，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種
。
（2）用酶解法處理平菇和杏鮑菇獲取原生質(zhì)體，酶解之前需先用較
高
高
（選填高或者低）滲透壓的溶液中處理。培養(yǎng)原生質(zhì)體時，需要向培養(yǎng)液中加入適宜濃度的甘露醇來維持
滲透壓
滲透壓
，以維持細(xì)胞正常的形態(tài)和功能。
（3）采用不同濃度PEG誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示：
| PEG質(zhì)量分?jǐn)?shù) |
25% |
30% |
35% |
40% |
| 原生質(zhì)體狀態(tài) |
有破碎現(xiàn)象啞鈴型細(xì)胞比例＜0.01% |
表現(xiàn)正常啞鈴型細(xì)胞比例0.03% |
原生質(zhì)體出現(xiàn)縮小現(xiàn)象啞鈴型細(xì)胞比例0.01～0.02% |
原生質(zhì)體出現(xiàn)縮小現(xiàn)象啞鈴型細(xì)胞比例0.01～0.02% |
兩個原生質(zhì)體融合效果較好時會呈現(xiàn)啞鈴型細(xì)胞，融合的原理是
細(xì)胞膜的流動性
細(xì)胞膜的流動性
。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：
質(zhì)量分?jǐn)?shù)30%的PEG溶液誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合效果最好，高于或低于30%不利于獲得融合的原生體
質(zhì)量分?jǐn)?shù)30%的PEG溶液誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合效果最好，高于或低于30%不利于獲得融合的原生體
。
（4）鑒定菌株間遺傳關(guān)系時，常將待測菌株的菌絲體接種于同一培養(yǎng)基內(nèi)，若兩菌絲體間長出“拮抗線”，說明二者的遺傳關(guān)系較遠(yuǎn)（見圖1）。借助此原理，快速篩選出一株與兩親本菌株遺傳關(guān)系較遠(yuǎn)的融合菌株X，請?jiān)趫D2中繪制模式圖，標(biāo)注接種菌絲體位置、菌株類型，預(yù)測拮抗線的位置并標(biāo)注。
（5）在組織培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，有一個MS培養(yǎng)基中沒有加入杠桿激素的培養(yǎng)瓶中也長出了與加有杠桿激素的培養(yǎng)瓶中一樣的愈傷組織，瓶中還長出了一些某種真菌的菌落。研究人員沒有放棄這難得的機(jī)遇，初步做出一個假設(shè)，繼續(xù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)：
他們就地取材，首先純化該真菌，再增設(shè)一組實(shí)驗(yàn)，具體做法是：在未添加杠桿激素的MS培養(yǎng)基中加入經(jīng)高壓蒸汽滅菌處理的該種真菌或經(jīng)高壓蒸汽滅菌處理過的
培養(yǎng)過該真菌
培養(yǎng)過該真菌
的培養(yǎng)基，再接種外植體，其他環(huán)境條件與正常組培相同，觀察能否培養(yǎng)出正常的愈傷組織。
預(yù)測結(jié)果：如果產(chǎn)生了正常的愈傷組織，支持該假設(shè)。如果沒有產(chǎn)生愈傷組織，不支持假設(shè)。他們做的假設(shè)是：
該真菌能產(chǎn)生杠桿激素（且不被高溫破壞）（或者該真菌能產(chǎn)生具有杠桿激素作用的物質(zhì)）
該真菌能產(chǎn)生杠桿激素（且不被高溫破壞）（或者該真菌能產(chǎn)生具有杠桿激素作用的物質(zhì)）
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