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間充質(zhì)干細胞是一種多能干細胞,在組織損傷修復領域有較廣泛的應用。成纖維細胞和由皮膚成纖維細胞轉(zhuǎn)變而來的肌成纖維細胞在創(chuàng)面愈合過程中起重要作用??蒲腥藛T對皮膚的創(chuàng)面愈合與細胞之間的相互作用做了以下研究。
(1)間充質(zhì)干細胞可以產(chǎn)生外泌體(由細胞產(chǎn)生并分泌到細胞外的囊泡),外泌體是由
磷脂(脂質(zhì))、蛋白質(zhì)、糖類、膽固醇
磷脂(脂質(zhì))、蛋白質(zhì)、糖類、膽固醇
(成分)構成的生物膜、包裹著內(nèi)部的蛋白質(zhì)和RNA等物質(zhì)組成的。
(2)以無胸腺裸鼠為實驗材料,進行如下實驗。
實驗一:將背部皮膚有創(chuàng)傷的裸鼠若干,平均分為三組,處理方法及一段時間后檢測結果如表所示。
組別 向創(chuàng)面皮下四周注射的物質(zhì) 觀察皮膚創(chuàng)面愈合情況 檢測αSMA表達量
1 緩沖液 傷口直徑大,瘢痕大 +++
2 間充質(zhì)干細胞+緩沖液 傷口直徑小,瘢痕小 +
3 間充質(zhì)干細胞外泌體+緩沖液 傷口直徑小,瘢痕小 +
注:①αSMA是肌成纖維細胞的標志產(chǎn)物
②在創(chuàng)面愈合過程中,肌成纖維細胞生成過度會造成瘢痕的增生。
從上述實驗結果可以推測,間充質(zhì)干細胞通過
外泌體
外泌體
加快創(chuàng)面愈合,同時通過
抑制成纖維細胞向肌成纖維細胞轉(zhuǎn)變
抑制成纖維細胞向肌成纖維細胞轉(zhuǎn)變
抑制瘢痕形成。
實驗二:研究間充質(zhì)干細胞外泌體對皮膚創(chuàng)面影響的機理。研究人員檢測不同物質(zhì)對成纖維細胞增殖能力的影響并通過劃痕實驗(原理如圖所示)檢測不同物質(zhì)對成纖維細胞遷移能力的影響。一段時間后,結果如表所示。
菁優(yōu)網(wǎng)
組別 向創(chuàng)面皮下四周注射的物質(zhì) 對成纖維細胞增殖能力的影響 劃痕距離
4 緩沖液 4.8 1
5 間充質(zhì)干細胞外泌體+緩沖液 9.5 0.5
6 去除間充質(zhì)干細胞和外泌體的培養(yǎng)基+緩沖液 5.0 1
①上述實驗中,組別6的作用是排除
培養(yǎng)基中的成分和間充質(zhì)干細胞的非外泌體分泌物對實驗的影響
培養(yǎng)基中的成分和間充質(zhì)干細胞的非外泌體分泌物對實驗的影響

②綜合實驗一、二,可以看出間充質(zhì)干細胞外泌體促進傷口愈合且皮膚瘢痕較小的原因是
增強成纖維細胞的增殖能力和遷移能力,同時抑制成纖維細胞向肌成纖維細胞的轉(zhuǎn)變
增強成纖維細胞的增殖能力和遷移能力,同時抑制成纖維細胞向肌成纖維細胞的轉(zhuǎn)變

(3)外泌體中含有多種物質(zhì),確定外泌體中發(fā)揮作用的關鍵物質(zhì)的實驗思路是
將外泌體中的物質(zhì)分離,分別觀察它們的作用
將外泌體中的物質(zhì)分離,分別觀察它們的作用
【答案】磷脂(脂質(zhì))、蛋白質(zhì)、糖類、膽固醇;外泌體;抑制成纖維細胞向肌成纖維細胞轉(zhuǎn)變;培養(yǎng)基中的成分和間充質(zhì)干細胞的非外泌體分泌物對實驗的影響;增強成纖維細胞的增殖能力和遷移能力,同時抑制成纖維細胞向肌成纖維細胞的轉(zhuǎn)變;將外泌體中的物質(zhì)分離,分別觀察它們的作用
【解答】
【點評】
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