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試題詳情
如圖1是獲取用于構建基因表達載體的含人生長激素基因的DNA片段（DNA復制子鏈延伸方向是5′→3′，轉錄方向為左→右）示意圖，圖2是所用質粒示意圖，其上的Ampr表示青霉素抗性基因，Tett表示四環(huán)素抗性基因。有關限制酶的識別序列和酶切位點如表。請據(jù)圖回答：
限制酶識別序列和酶切位點表
| 限制酶 | HindⅢ | BamHⅠ | PstⅠ | EcoRⅠ | SmaⅠ | BglⅡ |
| 識別序列（5′→3′） | A↓AGCTT | G↓GATCC | C↓TGCAG | G↓AATTC | CCC↓GGG | A↓GATCT |
反轉錄酶和DNA聚合酶
反轉錄酶和DNA聚合酶
，合成的人生長激素基因中有
有
（選填“有”或“無”）與終止密碼子相應的堿基序列。（2）引物1由5′→3′的堿基序列為
AGATCTGCATCCTCCAGG
AGATCTGCATCCTCCAGG
，引物2應含有限制酶BamHⅠ
BamHⅠ
的識別序列；從圖1的過程②開始進行PCR擴增，第六次循環(huán)結束時，圖中用于構建基因表達載體的DNA片段所占比例是13
16
13
16
（3）在構建表達載體的過程中對圖中質粒、DNA片段進行合適的完全酶切后，向兩者的混合物中加入DNA連接酶，若只考慮DNA切段兩兩連接，則混合物中將形成
6
6
種環(huán)狀DNA。（4）2018年11月基因編輯嬰兒事件震驚了世界，輿論一片嘩然，某科研團隊利用“CRISPR/Cas9”技術將受精卵中的艾滋病病毒受體基因CCR5進行修改，擬培育出具有艾滋病免疫能力的基因編輯嬰兒。圖3為向導RNA引導Cas9蛋白切割CCR5基因（目標DNA）示意圖。
①向導RNA的合成需要
RNA聚合
RNA聚合
酶。Cas9蛋白是一種限制
限制
酶。②“GRISPR/Cas9”技術，是利用
顯微注射
顯微注射
法將Cas9蛋白和特定的引導序列導入受精卵中發(fā)揮基因編輯作用。③基因編輯嬰兒引起輿論的關注，很多科學家表示反對，請給出合理的理由
細胞內DNA上可能不止一個Cas9酶識別和切割位點，可能導致脫靶
細胞內DNA上可能不止一個Cas9酶識別和切割位點，可能導致脫靶
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】反轉錄酶和DNA聚合酶；有；AGATCTGCATCCTCCAGG；BamHⅠ；；6；RNA聚合；限制；顯微注射；細胞內DNA上可能不止一個Cas9酶識別和切割位點，可能導致脫靶
13
16
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：67引用：5難度：0.6
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6