針對腫瘤細(xì)胞相關(guān)的異常分子和基因,可設(shè)計和研制特異性的靶點藥物,靶向殺傷腫瘤細(xì)胞。
(1)如圖1所示轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TfR)與轉(zhuǎn)鐵蛋白(Tf)結(jié)合,通過胞吞方式,將鐵元素運輸至胞內(nèi)。腫瘤細(xì)胞由于增長快速,需要更多的鐵元素,因此腫瘤細(xì)胞表面TfR 表達(dá)量上升上升(“上升”或“下降”)。利用單克隆抗體技術(shù),可研制相應(yīng)的抗TfR抗體,它們與TfR特異性結(jié)合,阻止了Tf與TfR結(jié)合,抑制鐵元素的攝取阻止了Tf與TfR結(jié)合,抑制鐵元素的攝取進(jìn)而影響腫瘤細(xì)胞增長。
(2)若想獲得單克隆抗體,可將免疫接種過TfR免疫接種過TfR的小鼠的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞融合,繼而篩選出既能無限增殖又能分泌抗體既能無限增殖又能分泌抗體的雜交瘤細(xì)胞,大量培養(yǎng)獲得相應(yīng)抗體,由于該抗體來源于小鼠,稱為鼠源單克隆抗體。
(3)將該鼠源單克隆抗體與人癌細(xì)胞混合后培養(yǎng),發(fā)現(xiàn)單獨使用抗體對人癌細(xì)胞的增殖無顯著影響,可能的原因是抗體與細(xì)胞表面TfR結(jié)合后同樣會被內(nèi)吞進(jìn)細(xì)胞;TfR最終會返回細(xì)胞膜表面,以至于抗體無法達(dá)到抑制細(xì)胞鐵攝取的目的,所以無法影響細(xì)胞增長同樣會被內(nèi)吞進(jìn)細(xì)胞;TfR最終會返回細(xì)胞膜表面,以至于抗體無法達(dá)到抑制細(xì)胞鐵攝取的目的,所以無法影響細(xì)胞增長,為探究該假說成立與否,采用熒光標(biāo)記定位的方法,結(jié)果發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)在細(xì)胞膜上和細(xì)胞內(nèi),則此實驗結(jié)果支持該假說。
(4)由于在本實驗中單獨使用抗體效果不佳,考慮利用抗體介導(dǎo)殺傷細(xì)胞對靶細(xì)胞的裂解作用來抑制癌細(xì)胞,該過程如圖2所示。若無論何種抗體,殺傷細(xì)胞都可與之結(jié)合,最終使靶細(xì)胞裂解死亡,則說明抗體Fc段在不同種類的抗體中相同相同(“相同”或“不同”)。
(5)人的殺傷細(xì)胞無法識別鼠源單克隆抗體的Fc段,科學(xué)家為此構(gòu)建了人-鼠嵌合抗體。該過程基本流程排序為BAECDBAECD。
A.逆轉(zhuǎn)錄獲得Fab基因編碼區(qū)
B.從分泌鼠源單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞中提取總RNA
C.將其導(dǎo)入細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá)
D.對基因的表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行鑒定
E.將Fab段的基因編碼區(qū)與人的Fc段基因進(jìn)行拼接,構(gòu)建含人-鼠嵌合抗體基因的質(zhì)粒
【考點】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】上升;阻止了Tf與TfR結(jié)合,抑制鐵元素的攝??;免疫接種過TfR;骨髓瘤細(xì)胞;既能無限增殖又能分泌抗體;同樣會被內(nèi)吞進(jìn)細(xì)胞;TfR最終會返回細(xì)胞膜表面,以至于抗體無法達(dá)到抑制細(xì)胞鐵攝取的目的,所以無法影響細(xì)胞增長;相同;BAECD
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:93引用:7難度:0.7
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1.為實現(xiàn)對肝癌的有效治療,研究人員通過比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點,制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
(1)檢測發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點。CLDN6蛋白是一個跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時,應(yīng)提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
2.為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用,某研究團隊對鼠源單克隆抗體F進(jìn)行改造,制備了人—鼠嵌合抗體F′,具體流程為:提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄后通過PCR擴增抗體F的基因序列,將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進(jìn)行替換,再構(gòu)建表達(dá)載體,在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測抗體性質(zhì),他們測定了F′單獨與抗原作用時對抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時與抗原作用(F′與F初始濃度相同)時F′對抗原的結(jié)合能力,結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯誤的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202304/369/62ee43c5.png" style="vertical-align:middle" />
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