重組PCR技術(shù)是一項新的PCR技術(shù),通過重組PCR技術(shù)能將兩個不同的DNA連接成為一個新DNA分子。某科研小組從豬源大腸桿菌中擴增得到LTB和ST1兩個基因片段,利用重組PCR技術(shù)構(gòu)建了LTB—ST1融合基因,制備過程如圖1所示?;卮鹣铝袉栴}:
(1)利用PCR技術(shù)擴增目的基因的過程中,向反應(yīng)體系中加入的物質(zhì)除了引物和模板鏈,還需要加入
耐高溫DNA聚合酶和4種脫氧核苷酸
耐高溫DNA聚合酶和4種脫氧核苷酸
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(2)從P2,P3兩種引物的角度分析,LTB和ST1基因能夠融合的關(guān)鍵是 這兩種引物的部分區(qū)域能進行堿基互補配對
這兩種引物的部分區(qū)域能進行堿基互補配對
。PCR1和PCR2不能在同一個反應(yīng)體系中進行,原因是 P2和P3能結(jié)合,會干擾引物和模板鏈的結(jié)合,影響PCR過程
P2和P3能結(jié)合,會干擾引物和模板鏈的結(jié)合,影響PCR過程
。②過程不需要加入引物,原因是 兩條母鏈可作為合成子鏈的引物
兩條母鏈可作為合成子鏈的引物
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(3)科研小組為了檢測是否成功構(gòu)建出融合基因,將反應(yīng)后體系中的各種DNA分子進行電泳,結(jié)果如圖2所示。則融合基因最可能是 3
3
,判斷依據(jù)是 融合基因包含2個不同的基因,其分子量較大,3表示的DNA分子量最大
融合基因包含2個不同的基因,其分子量較大,3表示的DNA分子量最大
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