某研究小組擬仿照制備乳腺生物反應器的研究思路，制備一種膀胱生物反應器來獲得W蛋白質，基本過程如圖所示。回答下列問題：

（1）步驟①要用到

限制酶和DNA連接

限制酶和DNA連接

酶，重組表達載體包括

復制原點、目的基因、啟動子，終止子和標記基因

復制原點、目的基因、啟動子，終止子和標記基因

（答出3個）等結構。在進行步驟④之前，需對代孕母體進行

同期發(fā)情

同期發(fā)情

處理，往往選擇發(fā)育至

桑椹胚或囊胚

桑椹胚或囊胚

時期的胚胎進行移植。
（2）相比乳腺生物反應器，膀胱生物反應器的優(yōu)勢主要在于

不受動物性別的限制、不受動物年齡的限制

不受動物性別的限制、不受動物年齡的限制

（答出2點）。
（3）圖中涉及的生物技術主要包括

轉基因技術、體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植

轉基因技術、體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植

（答出3項）。
（4）從雄性動物睪丸內和雌性動物卵巢內分別獲得的精子和卵母細胞能否直接用于體外受精？

不能

不能

，理由是

從雄性、雌性動物體內直接獲得的精子和卵母細胞不能直接進行受精作用，精子需要進行獲能處理、卵母細胞需要培養(yǎng)至MⅡ中期后才能受精

從雄性、雌性動物體內直接獲得的精子和卵母細胞不能直接進行受精作用，精子需要進行獲能處理、卵母細胞需要培養(yǎng)至MⅡ中期后才能受精

。