當(dāng)前位置:
試題詳情
在繁殖期間,大熊貓雄性和雌性都可與多個(gè)異性交配。動(dòng)物園圈養(yǎng)時(shí),為避免后代近親交配,導(dǎo)致群體生活力下降,需確定未知的親子關(guān)系。簡(jiǎn)單重復(fù)序列(SSR)也稱微衛(wèi)星DNA,它在大熊貓個(gè)體之間具有豐富的多樣性,可用于親子鑒定。請(qǐng)回答問題:
(1)大腸桿菌pUC18質(zhì)粒上的LacZ基因序列中沒有插入目的基因時(shí),在外源IPTC誘導(dǎo)下可表達(dá)出β-半乳糖苷酶,將培養(yǎng)基中的X-gal水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落。反之,則形成白色菌落。科學(xué)家利用pUC18質(zhì)粒,通過構(gòu)建基因文庫篩選大熊貓SSR位點(diǎn)(見圖1)。

①提取大熊貓基因組DNA,用同種限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶同種限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶處理DNA和pUC18質(zhì)粒,獲得重組質(zhì)粒后,將其與鈣離子鈣離子處理的大腸桿菌懸液混合,完成轉(zhuǎn)化。
②將試管Ⅱ中的菌液接種于選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),培養(yǎng)基中應(yīng)含有大腸桿菌必需的營養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子,還應(yīng)加入IPTG、X-galIPTG、X-gal以及氨芐青霉素,其中加入氨芐青霉素的作用是篩選出導(dǎo)入pUC18質(zhì)粒和重組質(zhì)粒篩選出導(dǎo)入pUC18質(zhì)粒和重組質(zhì)粒的大腸桿菌。
③觀察到培養(yǎng)基上出現(xiàn)白白色菌落,則說明大腸桿菌中已成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒,取該顏色菌落篩選SSR位點(diǎn),進(jìn)行測(cè)序,并設(shè)計(jì)引物通過PCR擴(kuò)增SSR位點(diǎn)。
(2)科學(xué)家對(duì)PCR擴(kuò)增的SSR位點(diǎn),對(duì)大熊貓進(jìn)行親子鑒定結(jié)果如圖2:由于基因突變的頻率較低,因此,子代1和子代2子代2是母本與疑似父本2的后代,而子代3子代3不是該母本的后代。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】同種限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶;鈣離子;IPTG、X-gal;篩選出導(dǎo)入pUC18質(zhì)粒和重組質(zhì)粒;白;子代2;子代3
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/5/23 20:38:36組卷:23引用:2難度:0.6
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