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在繁殖期間,大熊貓雄性和雌性都可與多個(gè)異性交配。動(dòng)物園圈養(yǎng)時(shí),為避免后代近親交配,導(dǎo)致群體生活力下降,需確定未知的親子關(guān)系。簡(jiǎn)單重復(fù)序列(SSR)也稱微衛(wèi)星DNA,它在大熊貓個(gè)體之間具有豐富的多樣性,可用于親子鑒定。請(qǐng)回答問題:
(1)大腸桿菌pUC18質(zhì)粒上的LacZ基因序列中沒有插入目的基因時(shí),在外源IPTC誘導(dǎo)下可表達(dá)出β-半乳糖苷酶,將培養(yǎng)基中的X-gal水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落。反之,則形成白色菌落。科學(xué)家利用pUC18質(zhì)粒,通過構(gòu)建基因文庫篩選大熊貓SSR位點(diǎn)(見圖1)。

①提取大熊貓基因組DNA,用
同種限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶
同種限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶
處理DNA和pUC18質(zhì)粒,獲得重組質(zhì)粒后,將其與
鈣離子
鈣離子
處理的大腸桿菌懸液混合,完成轉(zhuǎn)化。
②將試管Ⅱ中的菌液接種于選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),培養(yǎng)基中應(yīng)含有大腸桿菌必需的營養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子,還應(yīng)加入
IPTG、X-gal
IPTG、X-gal
以及氨芐青霉素,其中加入氨芐青霉素的作用是
篩選出導(dǎo)入pUC18質(zhì)粒和重組質(zhì)粒
篩選出導(dǎo)入pUC18質(zhì)粒和重組質(zhì)粒
的大腸桿菌。
③觀察到培養(yǎng)基上出現(xiàn)
色菌落,則說明大腸桿菌中已成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒,取該顏色菌落篩選SSR位點(diǎn),進(jìn)行測(cè)序,并設(shè)計(jì)引物通過PCR擴(kuò)增SSR位點(diǎn)。
(2)科學(xué)家對(duì)PCR擴(kuò)增的SSR位點(diǎn),對(duì)大熊貓進(jìn)行親子鑒定結(jié)果如圖2:由于基因突變的頻率較低,因此,子代1和
子代2
子代2
是母本與疑似父本2的后代,而
子代3
子代3
不是該母本的后代。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】同種限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶;鈣離子;IPTG、X-gal;篩選出導(dǎo)入pUC18質(zhì)粒和重組質(zhì)粒;白;子代2;子代3
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/5/23 20:38:36組卷:23引用:2難度:0.6
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  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí),解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     

    (4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
  • 3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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