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Cre-loxP系統(tǒng)能夠?qū)崿F(xiàn)特定基因的敲除,其技術(shù)過程如圖1所示??茖W(xué)家把幾種熒光蛋白基因和Cre酶能識(shí)別并切割的序列(loxP1和loxP2)串在一起,構(gòu)建如圖2所示的表達(dá)載體T,在Cre酶的作用下,一部分熒光蛋白基因會(huì)被隨機(jī)地“剪掉”,而剩下的部分得以表達(dá),這樣就可以隨機(jī)呈現(xiàn)不同的顏色。這種利用熒光蛋白“點(diǎn)亮”神經(jīng)元的大腦成像技術(shù)被稱為“腦彩虹”,能幫助科學(xué)家了解大腦。
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(1)loxP序列具有方向性,結(jié)構(gòu)如圖1所示,其中決定方向的序列是
(填序號(hào))。
(2)構(gòu)建表達(dá)載體T需要用到
限制酶和DNA連接
限制酶和DNA連接
酶,用
顯微注射
顯微注射
法將表達(dá)載體T導(dǎo)入小鼠的
受精卵
受精卵
細(xì)胞中,經(jīng)篩選后獲得細(xì)胞中含一個(gè)表達(dá)載體T的轉(zhuǎn)基因小鼠a(不含Cre酶)。小鼠a的腦組織細(xì)胞和其他組織細(xì)胞的色彩分別是
紅色
紅色
無(wú)色
無(wú)色
。
(3)已知兩個(gè)loxrP1之間或兩個(gè)loxP2之間的基因,最多會(huì)被Cre酶敲除一次。研究者將Cre酶基因與病毒基因重組構(gòu)建Cre病毒,然后將Cre病毒注入細(xì)胞中含一個(gè)表達(dá)載體T的轉(zhuǎn)基因小鼠A體內(nèi),出現(xiàn)“腦彩虹”現(xiàn)象,小鼠A的一個(gè)腦細(xì)胞的色彩為
紅色或黃色或藍(lán)色
紅色或黃色或藍(lán)色

(4)利用上述技術(shù)可以培育能夠在一個(gè)細(xì)胞內(nèi)隨機(jī)出現(xiàn)兩種顏色的“腦彩虹”小鼠,請(qǐng)依據(jù)題目信息,簡(jiǎn)要寫出設(shè)計(jì)思路。
設(shè)法使小鼠腦組織細(xì)胞內(nèi)有2個(gè)相同表達(dá)載體T,Cre酶對(duì)每個(gè)DNA片段隨機(jī)剪切,因而細(xì)胞的顏色由細(xì)胞內(nèi)兩種熒光蛋白的顏色隨機(jī)出現(xiàn)決定
設(shè)法使小鼠腦組織細(xì)胞內(nèi)有2個(gè)相同表達(dá)載體T,Cre酶對(duì)每個(gè)DNA片段隨機(jī)剪切,因而細(xì)胞的顏色由細(xì)胞內(nèi)兩種熒光蛋白的顏色隨機(jī)出現(xiàn)決定
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】②;限制酶和DNA連接;顯微注射;受精卵;紅色;無(wú)色;紅色或黃色或藍(lán)色;設(shè)法使小鼠腦組織細(xì)胞內(nèi)有2個(gè)相同表達(dá)載體T,Cre酶對(duì)每個(gè)DNA片段隨機(jī)剪切,因而細(xì)胞的顏色由細(xì)胞內(nèi)兩種熒光蛋白的顏色隨機(jī)出現(xiàn)決定
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:79引用:2難度:0.3
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  • 1.基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速,如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/11/14 7:0:1組卷:62引用:7難度:0.7
  • 2.經(jīng)由食物攝取過量生物胺會(huì)引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng),嚴(yán)重時(shí)甚至危及生命,因此必須對(duì)食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來(lái)源的多銅氧化酶(MCO)能高效分解生物胺,基于基因工程規(guī)?;a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國(guó)科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因,然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了高效表達(dá)。
    (1)通過上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物,涉及如下步驟,則合理的操作步驟排序是
     
    (填寫下列編號(hào))。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?;a(chǎn)目標(biāo)蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
    ⑤目的基因和運(yùn)載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
    (2)在PCR過程中,引物的功能是
     
    。
    A.啟動(dòng)DNA復(fù)制
    B.規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
    C.解旋DNA雙鏈
    D.充當(dāng)復(fù)制模板
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    (3)為獲得目的基因MCO(圖甲灰色表示的序列),正確設(shè)計(jì)的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     
    。
    (4)獲取目的基因后,需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    (填DNA或RNA/DNA或RNA)。
    (5)在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中,溫度隨時(shí)間的變化順序是圖乙中的
     

    (6)若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端,那么載體質(zhì)粒pCLY15(圖丙中圖1)需用
     
     
    切開,才能與MCO片段高效連接。
    (7)下列實(shí)驗(yàn)操作中,能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,用合適的限制酶切割
    B.在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑,以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
    C.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,以此為模板進(jìn)行PCR檢測(cè)
    D.將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc(四環(huán)素)的平板上,根據(jù)大腸桿菌生長(zhǎng)與否加以鑒別

    發(fā)布:2024/11/14 4:30:2組卷:29引用:3難度:0.5
  • 3.用限制酶EcoRⅤ單獨(dú)切割某普通質(zhì)粒,可產(chǎn)生14kb(1kb即1000個(gè)堿基對(duì))的長(zhǎng)鏈,而同時(shí)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒,可得到三種長(zhǎng)度的DNA片段,見圖(其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個(gè)黏性末端)。
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    若用MboⅠ限制酶單獨(dú)切割該普通質(zhì)粒,則產(chǎn)生的DNA片段的長(zhǎng)度為( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/14 4:0:2組卷:89引用:9難度:0.7
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