科研人員利用胚胎干細胞(ES細胞)對干擾素基因缺失小鼠進行基因治療。其技術(shù)流程如下圖1:
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(1)步驟①中,在核移植前應(yīng)去除卵母細胞的細胞核細胞核。
(2)將基因?qū)隕S細胞而不是導(dǎo)入到上皮細胞是因為ES細胞具有全能性ES細胞具有全能性。
(3)步驟③中,需要構(gòu)建含有干擾素基因的基因表達載體基因表達載體。構(gòu)建前利用PCR技術(shù)擴增干擾素基因時,可以從圖2中A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選取B和CB和C作為引物。對干擾素基因片段和質(zhì)粒進行酶切時,可選用限制酶的組合為HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠHindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ。
(4)將步驟③獲得的ES細胞在熒光顯微鏡下觀察,選擇發(fā)綠綠色熒光的細胞進行體外誘導(dǎo)。為檢測干擾素基因是否表達,可以采用抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交的方法。
【答案】細胞核;ES細胞具有全能性;基因表達載體;B和C;HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ;綠;抗原-抗體雜交
【解答】
【點評】
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