新型冠狀病毒（SARS-CoV-2）隸屬于β型冠狀病毒，遺傳物質(zhì)為單鏈RNA。為應(yīng)對(duì)由SARS-CoV-2引起的全球性疫情，不同的科研人員開(kāi)展了相關(guān)研究。
（1）新冠病毒的檢測(cè)方法主要有核酸檢測(cè)、抗體檢測(cè)、抗原檢測(cè)三大類。
①核酸檢測(cè)法如圖1 所示，因新冠病毒的RNA不能直接進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增，必須先經(jīng)過(guò) 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄成為 DNA，PCR 擴(kuò)增每次循環(huán)一般分為三步，其中耐高溫的 DNA 聚合酶參與的步驟是 延伸延伸。
②間接免疫熒光法如圖2所示：把SARS-CoV-2的標(biāo)本固定在玻片上，然后將待測(cè)病人的血清滴在玻片上，特異性抗體與標(biāo)本中抗原反應(yīng)后，再加入熒光素標(biāo)記的第二抗體（與第一抗體特異性結(jié)合），洗滌后在熒光顯微鏡下觀察。若 出現(xiàn)熒光標(biāo)記出現(xiàn)熒光標(biāo)記，則說(shuō)明待測(cè)病人為新 冠肺炎病毒感染者。
（2）疫苗接種是當(dāng)前新冠肺炎疫情防控工作的一項(xiàng)重要舉措，我國(guó)科學(xué)家研發(fā)了多種新冠疫苗，其中重組腺病毒疫苗研發(fā)策略是：將新冠病毒的 S蛋白基因整合到腺病毒 DNA中，形成表達(dá) S蛋白的重組腺病毒，注射到健康人體內(nèi)，腺病毒可侵染人體細(xì)胞，達(dá)到預(yù)防新冠 病毒感染的效果。
①與直接將 S 蛋白注射到體內(nèi)作為疫苗相比，重組腺病毒疫苗的優(yōu)點(diǎn)是可以引起人體產(chǎn)生 細(xì)胞細(xì)胞免疫，更有效清除病毒。
②為了構(gòu)建重組腺病毒DNA，需要將S蛋白基因插入腺病毒DNA中，由于腺病毒DNA分子較大，傳統(tǒng)的限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶處理效率較低，所以采取如圖3所示方法獲得重組腺病毒DNA。
將質(zhì)粒1和質(zhì)粒2共同導(dǎo)入受體細(xì)胞中，據(jù)圖3推測(cè)，最終重組線性DNA分子上，X所示的原件應(yīng)該為 Kan抗性基因Kan抗性基因。啟動(dòng)子的作用是 RNA聚合酶RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能 驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。
③生產(chǎn)疫苗的過(guò)程是將上述重組線性DNA分子（不編碼病毒復(fù)制必需的E1蛋白）導(dǎo)入到293細(xì)胞系（該細(xì)胞系可表達(dá)人體細(xì)胞沒(méi)有的E1蛋白），最終包裝成完整的腺病毒。這種方式生產(chǎn)的疫苗由于重組腺病毒 無(wú)法在人體宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制無(wú)法在人體宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，從而提高了疫苗的安全性。
④為了檢測(cè)疫苗的效果，科學(xué)家用不同方式給雪貂接種重組腺病毒疫苗后，感染新冠病毒，一段時(shí)間后檢測(cè)新冠病毒含量，結(jié)果如圖4，說(shuō)明重組腺病毒疫苗 （不論是滴鼻和口服還是肌肉注射都能夠）使機(jī)體產(chǎn)生新冠病毒的免疫能力（不論是滴鼻和口服還是肌肉注射都能夠）使機(jī)體產(chǎn)生新冠病毒的免疫能力，且效 果最好的免疫方式是 滴鼻和口服滴鼻和口服。
【答案】逆轉(zhuǎn)錄；延伸；出現(xiàn)熒光標(biāo)記；細(xì)胞；Kan抗性基因；RNA聚合酶；驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA；無(wú)法在人體宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制；（不論是滴鼻和口服還是肌肉注射都能夠）使機(jī)體產(chǎn)生新冠病毒的免疫能力；滴鼻和口服
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：51引用：1難度：0.6
相似題
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1．學(xué)習(xí)以下材料，回答（1）～（4）題。
利用抑制性tRNA進(jìn)行無(wú)義突變遺傳病的治療
無(wú)義突變是由于某個(gè)堿基的改變使代表某種氨基酸的密碼子突變?yōu)榻K止密碼子（UAA、UAG或UGA），從而使肽鏈合成提前終止，造成蛋白質(zhì)的功能改變，引發(fā)相關(guān)疾病。約有10%～15%的人類基因相關(guān)遺傳疾病是由無(wú)義突變引發(fā)的。常規(guī)的基因治療是將正?；虻腸DNA序列或是有治療價(jià)值的基因（如CRISPR-Cas9相關(guān)的基因編輯工具）通過(guò)一定的方式導(dǎo)入人體靶細(xì)胞內(nèi)，達(dá)到替代或修復(fù)缺陷基因、治療疾病的目的。導(dǎo)入基因插入位置不當(dāng)、過(guò)高或過(guò)低表達(dá)，都可能會(huì)導(dǎo)致副作用。盡管基因編輯可以實(shí)現(xiàn)生理水平的基因表達(dá)，但基因編輯工具引入外源蛋白可能引發(fā)強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)仍然是巨大的挑戰(zhàn)。
抑制性tRNA（sup-tRNA）由天然tRNA改造而來(lái)，它的反密碼子通過(guò)堿基配對(duì)原則可以識(shí)別無(wú)義突變的終止密碼子，使得mRNA在翻譯至無(wú)義突變位點(diǎn)時(shí)不啟動(dòng)翻譯終止而是繼續(xù)向后進(jìn)行翻譯，獲得有功能的全長(zhǎng)蛋白。
I型黏多糖貯積癥的病因，是相關(guān)基因發(fā)生無(wú)義突變，產(chǎn)生終止密碼子UAG。研究者構(gòu)建小鼠該突變基因mldua和Flag基因融合的載體（圖1），以及針對(duì)該無(wú)義突變?cè)O(shè)計(jì)的sup-tRNA表達(dá)載體（產(chǎn)生的sup-tRNA能夠識(shí)別UAG并攜帶酪氨酸Tyr,簡(jiǎn)寫作sup-tRNATyr），將其導(dǎo)入細(xì)胞進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)與具有相似作用的化合物G418比較，sup--tRNA的作用更加顯著（圖2）；進(jìn)一步利用重組腺相關(guān)病毒作為載體將sup-tRNA導(dǎo)入患病小鼠模型中，實(shí)驗(yàn)顯示能夠降低黏多糖過(guò)度積存，實(shí)現(xiàn)對(duì)該病癥的有效治療，其療效可以持續(xù)半年以上。
從整體來(lái)看，G418在促進(jìn)跨越無(wú)義突變位點(diǎn)繼續(xù)翻譯時(shí)引入的氨基酸較為隨機(jī)，而sup-tRNA引入的氨基酸較為單一，且不會(huì)影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài)，所以sup-tRNA在個(gè)體治療中具有很高的安全性，因而在未來(lái)基因突變引起的疾病相關(guān)治療中具有非常大的應(yīng)用前景。
（1）侵染時(shí)，作為載體的重組腺相關(guān)病毒與靶細(xì)胞膜上的發(fā)生識(shí)別，引發(fā)內(nèi)吞，進(jìn)入細(xì)胞后釋放單鏈DNA作為模板，利用宿主細(xì)胞的催化合成其互補(bǔ)DNA鏈，再經(jīng)過(guò)過(guò)程產(chǎn)生sup-tRNA。
（2）除了引入的氨基酸較為單一，不影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài)，我們還可推斷，用于治療的sup-tRNA在正常終止密碼子處（填“能”或“不能”）繼續(xù)往后翻譯，具有很高的安全性。
（3）研究者構(gòu)建mldua突變基因和Flag基因融合的載體，目的是通過(guò)檢測(cè)來(lái)確定是否跨越無(wú)義突變位點(diǎn)繼續(xù)向后翻譯。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，相比于化合物G418，sup-tRNA在促進(jìn)無(wú)義突變位點(diǎn)的翻譯方面更加有效，支持這一結(jié)論的依據(jù)是：。
（4）有文獻(xiàn)報(bào)道，已在近1000個(gè)不同的人類基因中發(fā)現(xiàn)了7500多個(gè)無(wú)義突變。常規(guī)的基因治療需要為每種疾病設(shè)計(jì)獨(dú)特的治療策略，這將是一項(xiàng)耗費(fèi)驚人的項(xiàng)目。據(jù)此說(shuō)明sup-tRNA的應(yīng)用價(jià)值。發(fā)布：2025/1/3 8:0:1組卷：27引用：1難度：0.6 -
2．人類基因組計(jì)劃測(cè)定了人體的24條染色體，這24條染色體是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 0:30:1組卷：112引用：7難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，自然界有些植物能產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶催化幾丁質(zhì)水解從而抵抗真菌感染。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入沒(méi)有抗性的植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌的能力。如圖表示為獲取幾丁質(zhì)酶基因而建立cDNA文庫(kù)的過(guò)程。
（1）圖示以mRNA為材料通過(guò)法獲得cDNA，該方法依據(jù)的原理是，通過(guò)這種方法獲得的基因中因缺乏和結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致將其直接導(dǎo)入受體細(xì)胞中不能復(fù)制和表達(dá)。
（2）與選用老葉相比，選用嫩葉更容易提取到mRNA，原因是，且提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（3）將從cDNA文庫(kù)中獲得的幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體用酶和DNA連接處理后連接起來(lái)，構(gòu)建基因表達(dá)載體，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：5引用：1難度：0.7