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人類胰島素基因位于第11號染色體上,長度8416bp,包含3個外顯子和2個內(nèi)含子,人類胰島素的氨基酸序列已知。回答相關(guān)問題:
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(1)如圖是利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因的方法,除了此方法外,還可以利用的方法是
從基因文庫獲取或人工合成
從基因文庫獲取或人工合成
。
(2)利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因,在緩沖液中除了要添加模板和引物外,還需要添加的物質(zhì)有
四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)
四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)

(3)經(jīng)過
3
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輪循環(huán)可以得到所需的目的基因,一個DNA分子經(jīng)過5輪循環(huán),需要引物A
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個,從PCR的過程和DNA分子的特點(diǎn),試著寫出設(shè)計(jì)引物需要注意的問題
引物自身不能有互補(bǔ)序列 引物之間不能有互補(bǔ)序列、引物長度適當(dāng)、引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合、避免與擴(kuò)增DNA內(nèi)有過多互補(bǔ)的序列
引物自身不能有互補(bǔ)序列 引物之間不能有互補(bǔ)序列、引物長度適當(dāng)、引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合、避免與擴(kuò)增DNA內(nèi)有過多互補(bǔ)的序列
(答出2點(diǎn)即可)。
(4)利用SDS-凝膠電泳分離不同DNA分子,遷移速度取決于
DNA分子的大小
DNA分子的大小
。
(5)利用圖示方法獲取的目的基因,直接構(gòu)建基因表達(dá)載體后導(dǎo)入大腸桿菌,能不能表達(dá)出人胰島素,判斷并說明理由
不能,因?yàn)榇朔椒ǐ@得的目的基因中含有內(nèi)含子,大腸桿菌無法正常識別內(nèi)含子而對內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)行翻譯,導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯誤
不能,因?yàn)榇朔椒ǐ@得的目的基因中含有內(nèi)含子,大腸桿菌無法正常識別內(nèi)含子而對內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)行翻譯,導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯誤

【答案】從基因文庫獲取或人工合成;四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶);3;31;引物自身不能有互補(bǔ)序列 引物之間不能有互補(bǔ)序列、引物長度適當(dāng)、引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合、避免與擴(kuò)增DNA內(nèi)有過多互補(bǔ)的序列;DNA分子的大??;不能,因?yàn)榇朔椒ǐ@得的目的基因中含有內(nèi)含子,大腸桿菌無法正常識別內(nèi)含子而對內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)行翻譯,導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯誤
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/5/23 20:38:36組卷:29引用:4難度:0.6
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  • 1.環(huán)境DNA(eDNA)技術(shù)是指從環(huán)境中提取DNA片段,結(jié)合PCR和DNA測序等分子生物學(xué)技術(shù)來定性或定量檢測目標(biāo)生物,從而確定其分布狀況等。科學(xué)家采用該技術(shù)對某海域進(jìn)行了物種信息普查研究,確認(rèn)了該海域出現(xiàn)的布氏鯨的身份信息及相關(guān)海域的魚類組成。下列敘述錯誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/9 12:0:1組卷:30引用:4難度:0.6
  • 2.為了對重金屬污染的土壤進(jìn)行生物修復(fù),研究者將從楊樹中克隆的重金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(HMA3)基因與外源高效啟動子連接,導(dǎo)入楊樹基因組中(如圖)。為檢測獲得的轉(zhuǎn)基因楊樹苗中是否含有導(dǎo)入的HMA3基因,同時避免內(nèi)源HMA3基因的干擾,在進(jìn)行PCR擴(kuò)增時,應(yīng)選擇的引物組合是(  )
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    (注:①、②、③、④表示引物)

    發(fā)布:2024/11/8 23:0:1組卷:185引用:22難度:0.8
  • 3.我國科學(xué)家經(jīng)過多年研究,成功利用PCR技術(shù)從長穗偃麥草基因組中擴(kuò)增出抗赤霉病關(guān)鍵基因Fhb7,揭示了其抗病分子機(jī)理和遺傳機(jī)理,并將該基因轉(zhuǎn)移至小麥品種中獲得穩(wěn)定的赤霉病抗性植株。回答下列問題:
    (1)利用PCR技術(shù)能從長穗偃麥草基因組中擴(kuò)增出基因Fhb7的原因是
     
    ,擴(kuò)增時常使用的酶是。為使PCR反應(yīng)體系中的模板鏈解鏈為單鏈,需要滿足的條件是
     
    。
    (2)要使基因Fhb7在受體細(xì)胞中表達(dá),需要通過載體而不能直接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,原因是
     
    (答出1條即可)。
    (3)將質(zhì)粒與基因Fhb7構(gòu)建成基因表達(dá)載體時,催化形成磷酸二酯鍵的酶是
     
    。
    (4)檢測基因Fhb7是否成功導(dǎo)入小麥細(xì)胞的方法是采用 技術(shù),此技術(shù)中用到的探針是在
     
    上用放射性同位素等作標(biāo)記制備的。

    發(fā)布:2024/11/8 21:0:2組卷:20引用:4難度:0.7
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