馬鈴薯是重要的塊莖類(lèi)糧食作物。二倍體馬鈴薯普遍存在自交不親和的現(xiàn)象，導(dǎo)致無(wú)法使用種子種植馬鈴薯。二倍體馬鈴薯的自交不親和是由核糖核酸酶基因（S-RNase）控制的，我國(guó)科研人員通過(guò)基因編輯技術(shù)敲除了馬鈴薯的S-RNase基因，獲得自交親和的二倍體馬鈴薯，為馬鈴薯雜交育種提供了全新的技術(shù)體系。下圖是科研人員用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)定點(diǎn)敲除S-RNase基因的示意圖，回答下列問(wèn)題：
（1）用于編輯不同基因的CRISPR/Cas9復(fù)合物中向?qū)NA堿基序列不同，因此首先要確定S-RNase基因中的待編輯序列，可以通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增S-RNase基因，作為編碼特定向?qū)NA的模板。擴(kuò)增時(shí)需要根據(jù) S-RNase基因的脫氧核苷酸序列S-RNase基因的脫氧核苷酸序列設(shè)計(jì)引物，引物的作用是 使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸。
（2）CRISPR/Cas9系統(tǒng)能精準(zhǔn)識(shí)別相關(guān)基因，依據(jù)的原理是向?qū)NA與目標(biāo)DNA發(fā)生 堿基互補(bǔ)配對(duì)堿基互補(bǔ)配對(duì)；Cas9蛋白可催化 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵（填化學(xué)鍵名稱(chēng)）水解，剪切特定DNA片段。
（3）欲檢測(cè)經(jīng)上述基因編輯技術(shù)得到的植株是否已具有自交親和性狀，最簡(jiǎn)便的方法是 讓該植株自交，觀察能否產(chǎn)生種子（或觀察該植株能否自交產(chǎn)生種子）讓該植株自交，觀察能否產(chǎn)生種子（或觀察該植株能否自交產(chǎn)生種子）。
（4）實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，CRISRP/Cas9基因編輯技術(shù)有時(shí)存在編輯對(duì)象出錯(cuò)而造成“脫靶”，向?qū)NA的序列長(zhǎng)短影響成功率，序列越短，脫靶率越高。脫靶最可能的原因是 非基因編輯對(duì)象也可能含有與向?qū)NA配對(duì)的堿基序列，造成向?qū)NA與之結(jié)合而脫靶非基因編輯對(duì)象也可能含有與向?qū)NA配對(duì)的堿基序列，造成向?qū)NA與之結(jié)合而脫靶。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】S-RNase基因的脫氧核苷酸序列；使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸；堿基互補(bǔ)配對(duì)；磷酸二酯鍵；讓該植株自交，觀察能否產(chǎn)生種子（或觀察該植株能否自交產(chǎn)生種子）；非基因編輯對(duì)象也可能含有與向?qū)NA配對(duì)的堿基序列，造成向?qū)NA與之結(jié)合而脫靶
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：16引用：3難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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