農(nóng)業(yè)上常用一定濃度的除草劑除去單子葉農(nóng)作物中的雙子葉雜草。農(nóng)業(yè)科研人員將抗除草劑基因轉(zhuǎn)入大豆,培育出抗除草劑大豆,培育過程中使用的質(zhì)粒如圖1所示,使用的含抗除草劑基因的DNA片段如圖2所示,使用含抗除草劑基因的農(nóng)桿菌對大豆細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化,并將該細(xì)胞培養(yǎng)成抗除草劑大豆幼苗的過程如圖3所示。已知限制性內(nèi)切核酸酶BamHⅠ、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ識別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT。請回答下列問題:
(1)質(zhì)粒是獨(dú)立于 真核細(xì)胞細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核DNA真核細(xì)胞細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核DNA之外,具有自我復(fù)制能力的環(huán)狀雙鏈DNA分子。構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),可以用限制酶 BamHⅠ(或Sau3AⅠ)BamHⅠ(或Sau3AⅠ)(只寫一種限制酶)切割質(zhì)粒,用限制酶 Sau3AⅠSau3AⅠ(只寫一種限制酶)切割含目的基因的DNA片段,這樣切割的缺陷是 會(huì)出現(xiàn)質(zhì)粒和抗除草劑基因的自身環(huán)化和反向連接會(huì)出現(xiàn)質(zhì)粒和抗除草劑基因的自身環(huán)化和反向連接。
(2)將上述切開的質(zhì)粒與抗除草劑基因混合,加入DNA連接酶連接后,導(dǎo)入大豆受體細(xì)胞(不考慮基因突變)。若將大豆受體細(xì)胞分別在含青霉素、四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),這些大豆受體細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)都能生長,在含青霉素的培養(yǎng)基上不能生長,在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上能生長在含青霉素的培養(yǎng)基上不能生長,在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上能生長,都不能生長都不能生長三種情況。
(3)從個(gè)體生物學(xué)水平上,鑒定圖3中轉(zhuǎn)抗除草劑基因大豆幼苗是否抗除草劑的方法是 用一定濃度的除草劑噴灑在轉(zhuǎn)抗除草劑基因大豆幼苗上,觀察其生長狀態(tài)用一定濃度的除草劑噴灑在轉(zhuǎn)抗除草劑基因大豆幼苗上,觀察其生長狀態(tài)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】真核細(xì)胞細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核DNA;BamHⅠ(或Sau3AⅠ);Sau3AⅠ;會(huì)出現(xiàn)質(zhì)粒和抗除草劑基因的自身環(huán)化和反向連接;在含青霉素的培養(yǎng)基上不能生長,在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上能生長;都不能生長;用一定濃度的除草劑噴灑在轉(zhuǎn)抗除草劑基因大豆幼苗上,觀察其生長狀態(tài)
【解答】
【點(diǎn)評】
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