農(nóng)業(yè)上常用一定濃度的除草劑除去單子葉農(nóng)作物中的雙子葉雜草。農(nóng)業(yè)科研人員將抗除草劑基因轉(zhuǎn)入大豆,培育出抗除草劑大豆,培育過程中使用的質(zhì)粒如圖1所示,使用的含抗除草劑基因的DNA片段如圖2所示,使用含抗除草劑基因的農(nóng)桿菌對大豆細胞進行轉(zhuǎn)化,并將該細胞培養(yǎng)成抗除草劑大豆幼苗的過程如圖3所示。已知限制性內(nèi)切核酸酶BamHⅠ、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ識別的堿基序列和酶切位點分別為G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT。請回答下列問題:
(1)質(zhì)粒是獨立于
真核細胞細胞核或原核細胞擬核DNA
真核細胞細胞核或原核細胞擬核DNA
之外,具有自我復制能力的環(huán)狀雙鏈DNA分子。構(gòu)建基因表達載體時,可以用限制酶 BamHⅠ(或Sau3AⅠ)
BamHⅠ(或Sau3AⅠ)
(只寫一種限制酶)切割質(zhì)粒,用限制酶 Sau3AⅠ
Sau3AⅠ
(只寫一種限制酶)切割含目的基因的DNA片段,這樣切割的缺陷是 會出現(xiàn)質(zhì)粒和抗除草劑基因的自身環(huán)化和反向連接
會出現(xiàn)質(zhì)粒和抗除草劑基因的自身環(huán)化和反向連接
。
(2)將上述切開的質(zhì)粒與抗除草劑基因混合,加入DNA連接酶連接后,導入大豆受體細胞(不考慮基因突變)。若將大豆受體細胞分別在含青霉素、四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),這些大豆受體細胞會出現(xiàn)都能生長,在含青霉素的培養(yǎng)基上不能生長,在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上能生長
在含青霉素的培養(yǎng)基上不能生長,在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上能生長
,都不能生長
都不能生長
三種情況。
(3)從個體生物學水平上,鑒定圖3中轉(zhuǎn)抗除草劑基因大豆幼苗是否抗除草劑的方法是 用一定濃度的除草劑噴灑在轉(zhuǎn)抗除草劑基因大豆幼苗上,觀察其生長狀態(tài)
用一定濃度的除草劑噴灑在轉(zhuǎn)抗除草劑基因大豆幼苗上,觀察其生長狀態(tài)
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