蒂蛀蟲(chóng)是荔枝的重要蟲(chóng)害，荔枝嫩葉受蛀時(shí)，中脈變褐色，干枯破裂；花穗受害，頂端枯死；果實(shí)被蛀，造成落果或品質(zhì)下降?？蒲腥藛T利用轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)荔枝的研究過(guò)程中，采用了圖示質(zhì)粒，其上有SalⅠ，HindⅢ和BamHⅠ三種限制酶切割位點(diǎn)。

（1）在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，選用

SalⅠ、HindⅢ

SalⅠ、HindⅢ

兩種限制酶切割目的基因的兩端及質(zhì)粒，可防止

目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化或反向連接

目的基因和質(zhì)粒的自我環(huán)化或反向連接

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（2）用分別含有氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選農(nóng)桿菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)含有目的基因的農(nóng)桿菌不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，這說(shuō)明

抗四環(huán)素基因被破壞

抗四環(huán)素基因被破壞

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（3）采用農(nóng)桿菌感染荔枝細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)是：

農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒含有一段T—DNA，能攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞，并將目的基因整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上

農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒含有一段T—DNA，能攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞，并將目的基因整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上

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（4）利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)荔枝植株，依據(jù)的原理是

植物細(xì)胞的全能性

植物細(xì)胞的全能性

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（5）導(dǎo)入抗蟲(chóng)基因的荔枝是否可以表達(dá)其遺傳特性，可利用

PCR

PCR

技術(shù)檢測(cè)抗蟲(chóng)基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，是否翻譯出與抗蟲(chóng)有關(guān)的蛋白質(zhì)則采用

抗原—抗體雜交

抗原—抗體雜交

技術(shù)，除上述分子水平檢測(cè)外，還需進(jìn)行個(gè)體水平上的抗蟲(chóng)性狀鑒定，可用的方法是

用轉(zhuǎn)基因荔枝嫩葉喂養(yǎng)蒂蛀蟲(chóng)，觀(guān)察蒂蛀蟲(chóng)的存活情況

用轉(zhuǎn)基因荔枝嫩葉喂養(yǎng)蒂蛀蟲(chóng)，觀(guān)察蒂蛀蟲(chóng)的存活情況

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