科研人員利用胚胎干細胞(ES細胞)對干擾素基因缺失小鼠進行基因治療,其技術流程如圖1所示,圖2、圖3分別表示干擾素基因及質粒的相關信息。
(1)在圖1治療過程中是否體現了細胞的全能性,為什么?
否
否
(填“是”或“否”),
因為沒有發(fā)育成完整個體
因為沒有發(fā)育成完整個體
。
(2)分析圖2、圖3,對干擾素基因片段和質粒進行酶切時,可選用的限制酶組合為
HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ
HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ
。
(3)為了得到實驗所需的大量干擾素基因,研究人員利用PCR技術進行擴增。由于DNA復制時,子鏈只能由5′→3′方向延伸,因此可以從圖2所示的A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選取
B和C
B和C
作為引物。若要將1個干擾素基因復制4次,則需要在緩沖液中至少加入
30
30
個引物。
(4)將步驟③獲得的ES細胞放在熒光顯微鏡下觀察,選擇發(fā)
綠
綠
色熒光的細胞進行體外誘導。為檢測干擾素基因是否表達,可以采用
抗原-抗體雜交
抗原-抗體雜交
方法進行檢測。
(5)科學家通過蛋白質工程技術將干擾素分子中的一個半胱氨酸變成絲氨酸,就可以在不影響其活性的前提下延長其保存周期。這項技術是以
蛋白質分子的結構規(guī)律及其與生物功能的關系
蛋白質分子的結構規(guī)律及其與生物功能的關系
為基礎而進行的操作。