大腸桿菌β-半乳糖苷酶(Z酶)可催化底物(X-gal)水解產(chǎn)生藍色物質(zhì)。在pUC18質(zhì)粒中,lacZ′編碼Z酶氨基端的一個片段(稱為α-肽),該質(zhì)粒結(jié)構(gòu)及限制酶識別位點如圖甲所示。已知α-肽、缺失α-肽的Z酶片段單獨存在時均無Z酶活性,共同存在時就會表現(xiàn)出Z酶活性。利用圖乙中的DNA片段與pUC18質(zhì)粒進行基因工程操作。
(1)限制酶能催化雙鏈DNA分子中磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵(填化學鍵名稱)的斷裂。本實驗可使用限制酶Sal ISal I處理pUC18質(zhì)粒和圖乙中的DNA片段,再通過DNA連接酶連接,獲得含目的基因的重組質(zhì)粒。
(2)用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌,然后將大腸桿菌接種到含氨芐青霉素的固體培養(yǎng)基上進行培養(yǎng),由于未發(fā)生轉(zhuǎn)化的大腸桿菌沒有該質(zhì)粒,因而不具有氨芐青霉素抗性氨芐青霉素抗性,在該培養(yǎng)基上不能生長。從功能上劃分,該培養(yǎng)基屬于選擇選擇培養(yǎng)基。
(3)當上述培養(yǎng)基中含有X-gal時,生長出的菌落有藍色和白色兩種類型,其中含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌的菌落顏色為白色白色,這是因為目的基因與質(zhì)粒連接后使lacZ′被破壞,不能合成α-肽目的基因與質(zhì)粒連接后使lacZ′被破壞,不能合成α-肽。為保證能通過菌落顏色辨別出含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌,本實驗作為受體細胞的大腸桿菌中Z酶基因應(yīng)滿足的條件是編碼α-肽的DNA序列缺失,其他序列正常編碼α-肽的DNA序列缺失,其他序列正常。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】磷酸二酯鍵;Sal I;氨芐青霉素抗性;選擇;白色;目的基因與質(zhì)粒連接后使lacZ′被破壞,不能合成α-肽;編碼α-肽的DNA序列缺失,其他序列正常
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:44引用:3難度:0.7
相似題
-
1.紅細胞生成素(EPO)是人體內(nèi)促進紅細胞生成的一種糖蛋白,可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然 EPO來源極為有限,某科研團隊采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器,使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述錯誤的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/12/20 5:0:2組卷:35引用:5難度:0.6 -
2.煙草是我國一些地區(qū)的經(jīng)濟作物之一,提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟收入。我國科研團隊研究了一種轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種,抗鹽基因的結(jié)構(gòu)和獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程(①~⑤)如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:
(1)獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有
(2)為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒,應(yīng)該選擇
(3)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程
(4)⑤過程需要用到發(fā)布:2024/12/20 2:30:1組卷:16引用:5難度:0.5 -
3.如表為5種限制酶的識別序列及切割位點,如圖為某種質(zhì)粒和目的基因,箭頭所指為限制酶酶切位點?,F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中,以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是( ?。?
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
把好題分享給你的好友吧~~