浙江大學農(nóng)學院喻景權教授課題組研究發(fā)現(xiàn),一種植物激素--油菜素內(nèi)酯能促進農(nóng)藥在植物體內(nèi)的降解和代謝。用油菜素內(nèi)酯處理后,許多參與農(nóng)藥降解的基因(如P450基因和紅霉素抗性基因)的表達和酶活性都得到提高,在這些基因“指導”下合成的蛋白酶能把農(nóng)藥逐漸轉(zhuǎn)化為水溶性物質(zhì)或低毒甚至無毒物質(zhì),有的則被直接排出體外。某課題進行了如圖的操作,請回答下列問題:
(1)獲得油菜素內(nèi)酯合成酶基因的方法 從基因文庫中獲取、人工合成的目的基因、利用PCR技術擴增從基因文庫中獲取、人工合成的目的基因、利用PCR技術擴增(至少答出兩種)。步驟①用PCR技術擴增基因的前提是 要有一段已知目的基因的核苷酸序列要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列合成 引物引物;步驟②用到的酶有 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶。
(2)圖中導入重組質(zhì)粒的方法是 感受態(tài)細胞轉(zhuǎn)化法感受態(tài)細胞轉(zhuǎn)化法,在導入之前應用一定濃度的 氯化鈣溶液氯化鈣溶液處理受體細菌。
(3)導入重組質(zhì)粒2以后,往往還需要進行檢測和篩選,在含有 目的基因的DNA片段上目的基因的DNA片段上用放射性同位素標記制成探針,檢測是否導入了重組基因,在培養(yǎng)基中加入 紅霉素紅霉素可將含有目的基因的細胞篩選出來。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】從基因文庫中獲取、人工合成的目的基因、利用PCR技術擴增;要有一段已知目的基因的核苷酸序列;引物;限制酶和DNA連接酶;感受態(tài)細胞轉(zhuǎn)化法;氯化鈣溶液;目的基因的DNA片段上;紅霉素
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:2引用:3難度:0.7
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