浙江大學農(nóng)學院喻景權教授課題組研究發(fā)現(xiàn)，一種植物激素--油菜素內(nèi)酯能促進農(nóng)藥在植物體內(nèi)的降解和代謝。用油菜素內(nèi)酯處理后，許多參與農(nóng)藥降解的基因（如P450基因和紅霉素抗性基因）的表達和酶活性都得到提高，在這些基因“指導”下合成的蛋白酶能把農(nóng)藥逐漸轉化為水溶性物質或低毒甚至無毒物質，有的則被直接排出體外。某課題進行了如圖的操作，請回答下列問題：

（1）獲得油菜素內(nèi)酯合成酶基因的方法

從基因文庫中獲取、人工合成的目的基因、利用PCR技術擴增

從基因文庫中獲取、人工合成的目的基因、利用PCR技術擴增

（至少答出兩種）。步驟①用PCR技術擴增基因的前提是

要有一段已知目的基因的核苷酸序列

要有一段已知目的基因的核苷酸序列

，以便根據(jù)這一序列合成

引物

引物

；步驟②用到的酶有

限制酶和DNA連接酶

限制酶和DNA連接酶

。
（2）圖中導入重組質粒的方法是

感受態(tài)細胞轉化法

感受態(tài)細胞轉化法

，在導入之前應用一定濃度的

氯化鈣溶液

氯化鈣溶液

處理受體細菌。
（3）導入重組質粒2以后，往往還需要進行檢測和篩選，在含有

目的基因的DNA片段上

目的基因的DNA片段上

用放射性同位素標記制成探針，檢測是否導入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入

紅霉素

紅霉素

可將含有目的基因的細胞篩選出來。