圖1是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程示意圖，載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因（tetr）和氨芐青霉素抗性基因（ampr）。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）EcoR V酶切位點(diǎn)為
，EcoR V酶切出來(lái)的線性載體P1為平平末端。
（2）用Taq DNA聚合酶進(jìn)行PCR擴(kuò)增獲得的目的基因片段，其兩端各自帶有一個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸。載體P1用酶處理，在兩端各添加了一個(gè)堿基為胸腺嘧啶（T）胸腺嘧啶（T）的脫氧核苷酸，形成P2；P2和目的基因片段在DNA連接DNA連接酶作用下，形成重組質(zhì)粒P3。
（3）為篩選出含有重組質(zhì)粒P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板進(jìn)行篩選，得到A、B、C三類菌落，其生長(zhǎng)情況如下表（“+”代表生長(zhǎng)，“-”代表不生長(zhǎng)）。根據(jù)表中結(jié)果判斷，應(yīng)選擇的菌落是BB（填表中字母）類，另外兩類菌落質(zhì)粒導(dǎo)入情況分別是A類菌落含有P0A類菌落含有P0、C類菌落未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒C類菌落未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒。
|
A | B | C |
| 無(wú)抗生素 | + | + | + |
| 氨芐青霉素 | + | + | - |
| 四環(huán)素 | + | - | - |
| 氨芐青霉素+四環(huán)素 | + | - | - |
乙丙
乙丙
。某學(xué)生嘗試用圖中另外一對(duì)引物從某一菌落的質(zhì)粒中擴(kuò)增出了400bp片段，原因是目的基因反向連接
目的基因反向連接
。【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】平；胸腺嘧啶（T）；DNA連接；B；A類菌落含有P0；C類菌落未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒；乙丙；目的基因反向連接
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/5/23 20:38:36組卷：527引用：11難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問(wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6