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2023-2024學(xué)年江蘇省鎮(zhèn)江市句容三中、南通市海安實(shí)驗(yàn)中學(xué)聯(lián)考高三(上)月考生物試卷(10月份)>
試題詳情
土壤鹽漬化影響水稻生長(zhǎng)發(fā)育,將水稻耐鹽堿基因OsMYB56導(dǎo)入不耐鹽堿水稻品種吉粳88中,培育耐鹽堿水稻新品種,其操作流程及可能用到的限制酶如圖,其中bar為抗除草劑基因,Tetr為四環(huán)素抗性基因,Ampr為氨芐青霉素抗性基因,①~⑦表示操作過程。
限制酶 | BamHⅠ | BclⅠ | SmaⅠ | Sau3AⅠ |
識(shí)別位點(diǎn)及切割位點(diǎn) | -G↓GATCC- | -T↓GATCA- | -CCC↓GGG- | -↓GATC- |
5'
5'
(“5'”或“3'”)端,過程①PCR擴(kuò)增OsMYB56基因時(shí)加入的酶催化 磷酸二酯(鍵)
磷酸二酯(鍵)
鍵的形成,還需要添加引物,應(yīng)選用引物組合 ①④
①④
。①5'-CTTGGATGAT-3'
②5'-TAAGTTGTCT-3'
③5'-TAGTAGGTTC-3'
④5'-TCTGTTGAAT-3
⑤5'-ATTCAACAGA-3'
⑥5'-ATCATCCAAG-3'
(2)根據(jù)基因表達(dá)載體的結(jié)構(gòu)組成分析,Ti質(zhì)粒中的CaMV35S是
啟動(dòng)子
啟動(dòng)子
,其功能是 RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,(啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄過程)
RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,(啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄過程)
?;虮磉_(dá)載體中,OsMYB56基因和bar基因編碼鏈的方向 相反
相反
(填“相同”或“相反”)。(3)過程③應(yīng)選用限制酶
BclⅠ和SmaⅠ
BclⅠ和SmaⅠ
切割質(zhì)粒,利用所選限制酶進(jìn)行操作的優(yōu)勢(shì)是 防止酶切后的質(zhì)粒自身環(huán)化,保證OsMYB56和酶切后的質(zhì)粒定向連接
防止酶切后的質(zhì)粒自身環(huán)化,保證OsMYB56和酶切后的質(zhì)粒定向連接
,切割后需要用 T4DNA連接酶
T4DNA連接酶
進(jìn)行連接才能獲得重組質(zhì)粒。(4)為了篩選出含重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞,④過程應(yīng)在添加
四環(huán)素
四環(huán)素
的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)。培養(yǎng)后獲得的菌落不能判定是否含有重組質(zhì)粒,原因是 含未重組Ti質(zhì)粒(或普通Ti質(zhì)粒)的受體細(xì)胞也能正常生長(zhǎng)
含未重組Ti質(zhì)粒(或普通Ti質(zhì)粒)的受體細(xì)胞也能正常生長(zhǎng)
。【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】5';磷酸二酯(鍵);①④;啟動(dòng)子;RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,(啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄過程);相反;BclⅠ和SmaⅠ;防止酶切后的質(zhì)粒自身環(huán)化,保證OsMYB56和酶切后的質(zhì)粒定向連接;T4DNA連接酶;四環(huán)素;含未重組Ti質(zhì)粒(或普通Ti質(zhì)粒)的受體細(xì)胞也能正常生長(zhǎng)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/12 8:0:8組卷:15引用:5難度:0.5
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