當(dāng)前位置： 2023年陜西省西安市西咸新區(qū)高考生物二模試卷> 試題詳情

磷酸吡哆醛（PLP）是維生素B6的活性形式，是多種酶的重要輔酶。科研人員從大腸桿菌（E?coliK12）中找到了合成PLP的關(guān)鍵酶A，通過(guò)基因工程構(gòu)建了高產(chǎn)PLP的工程菌，流程如圖所示，IPTG可誘導(dǎo)lacI啟動(dòng)酶A基因表達(dá)?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）在基因工程中，①過(guò)程得到的酶A基因稱為
目的基因
目的基因
。PCR技術(shù)擴(kuò)增酶A基因過(guò)程中，變性的目的是
使酶A基因DNA雙鏈解為單鏈
使酶A基因DNA雙鏈解為單鏈
。
（2）在構(gòu)建pETDuet-1-A表達(dá)載體過(guò)程中，酶A基因與質(zhì)粒在DNA連接酶的作用下通過(guò)
磷酸二酯
磷酸二酯
鍵連接起來(lái)。③過(guò)程常用Ca²⁺處理，并在一定溫度下促進(jìn)E?coliBL21吸收表達(dá)載體從而完成
轉(zhuǎn)化
轉(zhuǎn)化
過(guò)程。
（3）③過(guò)程后將工程菌先置于含
氨芐青霉素
氨芐青霉素
的培養(yǎng)基中篩選出能夠生長(zhǎng)的菌落，再做進(jìn)一步篩選即可得到所需菌落。為驗(yàn)證④過(guò)程得到的是否為高產(chǎn)PLP工程菌，某同學(xué)進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)簡(jiǎn)要寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路：
將原始E?coliBL21菌株與重組菌株分別在含有適量IPTG的培養(yǎng)液中適宜條件下培養(yǎng)，一段時(shí)間后分別檢測(cè)培養(yǎng)液中PLP的含量
將原始E?coliBL21菌株與重組菌株分別在含有適量IPTG的培養(yǎng)液中適宜條件下培養(yǎng)，一段時(shí)間后分別檢測(cè)培養(yǎng)液中PLP的含量
。
（4）研究表明，當(dāng)IPTG濃度過(guò)高時(shí)，PLP產(chǎn)量反而下降，其原因可能是
IPTG濃度過(guò)高會(huì)抑制工程菌的生長(zhǎng)
IPTG濃度過(guò)高會(huì)抑制工程菌的生長(zhǎng)
。

【答案】目的基因；使酶A基因DNA雙鏈解為單鏈；磷酸二酯；轉(zhuǎn)化；氨芐青霉素；將原始E?coliBL21菌株與重組菌株分別在含有適量IPTG的培養(yǎng)液中適宜條件下培養(yǎng)，一段時(shí)間后分別檢測(cè)培養(yǎng)液中PLP的含量；IPTG濃度過(guò)高會(huì)抑制工程菌的生長(zhǎng)

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：1引用：2難度：0.6

相似題

1．某科研小組從土壤菌株A、B中分離到同源性為93%的Bt1抗蟲(chóng)基因和Bt2抗蟲(chóng)基因的編碼序列，并運(yùn)用交錯(cuò)延伸PCR技術(shù)獲得了抗蟲(chóng)性能強(qiáng)的重組B基因，轉(zhuǎn)入煙草獲得成功，過(guò)程如圖所示。下列選項(xiàng)正確的是（　?。?br />
注：①交錯(cuò)延伸PCR：基因Bt1和Bt2均作為模板，所需引物相同，圖中僅示其中一條鏈的延伸情況。②啟動(dòng)子Pr1a可在煙草葉肉細(xì)胞中特異性啟動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄。③圖中生長(zhǎng)素合成酶基因是通過(guò)成熟mRNA逆轉(zhuǎn)錄獲得的DNA片段，可使植物細(xì)胞合成生長(zhǎng)素。

A．若用EcoRⅠ（5'-G↓AATTC-3'）和限制酶XmaⅠ（5'-G↓CCGGG-3'）雙酶切多個(gè)目的基因，能避免兩個(gè)目的基因連接成環(huán)

B．復(fù)制原點(diǎn)是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)

C．在培養(yǎng)愈傷組織的培養(yǎng)基中添加卡那霉素可以篩選含有Bt重組基因的細(xì)胞

D．圖中生長(zhǎng)素合成酶基因不能促進(jìn)愈傷組織生根

發(fā)布：2024/11/16 21:0:1組卷：36引用：2難度：0.5

解析

2．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（　?。?br />

A．若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動(dòng)子序列

B．?dāng)U增目的基因時(shí)，利用耐高溫的DNA連接酶從引物a、b的3′-端進(jìn)行子鏈合成

C．導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞是乳腺細(xì)胞

D．利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將含有目的基因的重組質(zhì)粒整合到植物受體細(xì)胞的染色體DNA上

發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

解析

3．經(jīng)由食物攝取過(guò)量生物胺會(huì)引起頭痛、胃腸道不適和過(guò)敏等不良反應(yīng)，嚴(yán)重時(shí)甚至危及生命，因此必須對(duì)食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來(lái)源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)?；a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國(guó)科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了高效表達(dá)。
（1）通過(guò)上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是

（填寫(xiě)下列編號(hào)）。
①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
②選用合適的方法獲取目的基因
③借助發(fā)酵工程規(guī)?；a(chǎn)目標(biāo)蛋白
④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
⑤目的基因和運(yùn)載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
（2）在PCR過(guò)程中，引物的功能是

。
A．啟動(dòng)DNA復(fù)制
B．規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
C．解旋DNA雙鏈
D．充當(dāng)復(fù)制模板

（3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設(shè)計(jì)的PCR引物應(yīng)為圖甲中的

。
（4）獲取目的基因后，需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是

（填DNA或RNA/DNA或RNA）。
（5）在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中，溫度隨時(shí)間的變化順序是圖乙中的

。
（6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開(kāi)后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用

和

切開(kāi)，才能與MCO片段高效連接。
（7）下列實(shí)驗(yàn)操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是

。
A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
B．在選擇培養(yǎng)基中添加X(jué)-gal試劑，以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進(jìn)行PCR檢測(cè)
D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長(zhǎng)與否加以鑒別
發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5
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2．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?br />

2．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（　?。?br />