如圖為“乙肝基因工程疫苗”生產和使用過程圖解,質粒上箭頭所指部位為相應的限制性內切核酸酶的切割位點。質粒中 lacZ 基因可使細菌利用加入培養(yǎng)基的物質X-gal,使菌落顯現(xiàn)出藍色;若無該基因,菌落則成白色。請回答下列問題:

(1)構建基因表達載體時,雙酶切與單酶切相比,其好處有防止 目的基因自身環(huán)化目的基因自身環(huán)化和防止 目的基因反向接入質粒目的基因反向接入質粒。
根據(jù)圖示,該過程中獲取目的基因最好使用的限制性內切核酸酶是 BamHⅠ和EcoRⅠBamHⅠ和EcoRⅠ。
(2)過程①需要的酶是 DNA連接酶DNA連接酶,過程②需要先將大腸桿菌用 Ca2+Ca2+處理,目的是 使大腸桿菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)使大腸桿菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。
(3)篩選轉基因成功的大腸桿菌,需要在培養(yǎng)基中加入 青霉素青霉素和 X-galX-gal,如果出現(xiàn) 白色白色菌落,說明基因表達載體成功轉入大腸桿菌。
(4)③過程需要經(jīng)過 轉錄轉錄和 翻譯翻譯過程,其中在大腸桿菌核糖體上完成的過程是 翻譯翻譯。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】目的基因自身環(huán)化;目的基因反向接入質粒;BamHⅠ和EcoRⅠ;DNA連接酶;Ca2+;使大腸桿菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài);青霉素;X-gal;白色;轉錄;翻譯;翻譯
【解答】
【點評】
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