埃博拉病毒(EBoV)衣殼外有包膜,包膜上有多種棘突蛋白,其中GP蛋白最為關(guān)鍵,能被宿主細(xì)胞識別。如圖為制備抗埃博拉病毒單克隆抗體的過程?;卮鹣铝袉栴}:
(1)制備抗埃博拉病毒單克隆抗體時,需要用滅活的EBoV對小鼠進(jìn)行多次注射的目的是
刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多已免疫的B淋巴細(xì)胞(細(xì)胞A)
刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多已免疫的B淋巴細(xì)胞(細(xì)胞A)
。
(2)細(xì)胞融合的原理是 細(xì)胞膜具有(一定的)流動性
細(xì)胞膜具有(一定的)流動性
。誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合常用的方法除了電融合和 聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)法
聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)法
外,還可以用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo)。
(3)單克隆抗體制備過程中要經(jīng)過兩次篩選。第一次篩選出雜交瘤細(xì)胞,再對雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行 克隆化培養(yǎng)和抗體檢測
克隆化培養(yǎng)和抗體檢測
,經(jīng)多次篩選后可獲得足夠數(shù)量的單克隆抗體。篩選后單克隆抗體具備的特點(diǎn)是 既能無限增殖又能產(chǎn)生(抗埃博拉病毒的)單一抗體
既能無限增殖又能產(chǎn)生(抗埃博拉病毒的)單一抗體
。
(4)體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)種類要齊全,比例要合適,此外為補(bǔ)充細(xì)胞生長所需的未知營養(yǎng)物質(zhì)還需要添加 血清
血清
。獲得的單克隆抗體最終可以從 小鼠腹水或培養(yǎng)液
小鼠腹水或培養(yǎng)液
中提取。