犬細(xì)小病毒(CPV)主要感染幼犬,傳染性極強(qiáng),死亡率也高。利用小鼠制備抗CPV單克隆抗體的基本流程如圖所示。回答下列問(wèn)題:
(1)制備單克隆抗體依賴(lài)的生物技術(shù)有
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合
(答出2點(diǎn))。步驟①中,用滅活的CPV免疫小鼠需要在一定時(shí)間內(nèi)間隔注射3次,其目的是 加強(qiáng)免疫,刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多已免疫的B淋巴細(xì)胞
加強(qiáng)免疫,刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多已免疫的B淋巴細(xì)胞
。
(2)促進(jìn)兩種細(xì)胞融合的常用誘導(dǎo)劑是 聚乙二醇(PEG)或滅活病毒
聚乙二醇(PEG)或滅活病毒
,經(jīng)過(guò)步驟②后獲得的是多種類(lèi)型的雜交細(xì)胞,原因是 細(xì)胞融合是隨機(jī)的
細(xì)胞融合是隨機(jī)的
。對(duì)雜交細(xì)胞等用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選得到雜交瘤細(xì)胞,對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行 克隆化培養(yǎng)、抗體檢測(cè)
克隆化培養(yǎng)、抗體檢測(cè)
,經(jīng)過(guò)多次篩選才能獲得足夠數(shù)量的能分泌抗CPV抗體的細(xì)胞。
(3)體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞后從培養(yǎng)液中提取到抗CPV單克隆抗體。雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)液中有各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),還需要添加 血清和抗生素
血清和抗生素
以補(bǔ)充細(xì)胞生長(zhǎng)所需的未知營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和防止雜菌污染。
(4)對(duì)疑似感染CPV的幼犬進(jìn)行確診時(shí),可用獲得的抗CPV單克隆抗體進(jìn)行 抗原—抗體雜交
抗原—抗體雜交
檢測(cè)。