試卷征集
加入會(huì)員
操作視頻

隨著全球轉(zhuǎn)基因作物大規(guī)模種植和全球一體化下頻繁的貿(mào)易流通,轉(zhuǎn)基因監(jiān)管的任務(wù)將越來(lái)越重。為了還給消費(fèi)者知情權(quán)和選擇權(quán),多個(gè)國(guó)家和地區(qū)對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品實(shí)行標(biāo)識(shí)管理制度,這些法規(guī)實(shí)施的前提就是要建立穩(wěn)定、準(zhǔn)確的轉(zhuǎn)基因檢測(cè)技術(shù)。PCR轉(zhuǎn)基因檢測(cè)技術(shù)被多國(guó)檢測(cè)工作者使用,該技術(shù)通常包括核酸提取、核酸擴(kuò)增、擴(kuò)增產(chǎn)物檢測(cè)3個(gè)步驟。某研究小組設(shè)計(jì)并完成了“轉(zhuǎn)基因抗草甘膦大豆定性PCR檢測(cè)”實(shí)驗(yàn),請(qǐng)參與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)并回答相關(guān)問(wèn)題(草甘膦為常用除草劑;轉(zhuǎn)基因抗草甘膦大豆的外源基因構(gòu)建圖如圖1所示):
菁優(yōu)網(wǎng)
(1)提取DNA:取待測(cè)大豆組織裂解破碎,進(jìn)行DNA提取和純化,得到待測(cè)大豆基因組DNA。該過(guò)程的常用的試劑有EDTA、SDS、NaCl、酒精等。在研磨液中加入NaCl的目的是
溶解DNA
溶解DNA
,提取到的DNA可以用
二苯胺
二苯胺
試劑鑒定。
(2)DNA擴(kuò)增:
①在確定擴(kuò)增對(duì)象后,從
序列數(shù)據(jù)庫(kù)
序列數(shù)據(jù)庫(kù)
中獲得待擴(kuò)增基因序列,以此為依據(jù)可設(shè)計(jì)引物。該小組擬定的引物設(shè)計(jì)如表所示,其引物設(shè)計(jì)有一個(gè)是不科學(xué)的,請(qǐng)指出并說(shuō)明原因
CaMV35S的引物設(shè)計(jì)不科學(xué),原因是引物太短、特異性弱,并且兩個(gè)引物之間會(huì)互補(bǔ)結(jié)合
CaMV35S的引物設(shè)計(jì)不科學(xué),原因是引物太短、特異性弱,并且兩個(gè)引物之間會(huì)互補(bǔ)結(jié)合
。
基因 引物序列 產(chǎn)物片段大小 基因來(lái)源
Lectin F-5'GCC CTC TAC TCC ACC CCC ATC C-3'
R-5'GCC CAT CTG CAA GCC TTT TTG TG-3'
118 內(nèi)源基因
CaMV35S F-5'GGG ATT-3'
R-5'AAT CCC-3'
195 外源基因
NOS F-5'GAA TCC TGT TGC CGG TCT TG-3'
R-5'TTA TCC TAG TTT GCG CGC TA-3'
180 外源基因
CP4-EPSPS F-5'CTT CTG TGC TGT AGC CAC TGA TGC-3
R-5'CCA CTA TCC TTC GCA AGA CCC TTC-3
320 外源基因
注:內(nèi)源基因指大豆基因組內(nèi)基因,外源基因指大豆基因組外基因。
②PCR擴(kuò)增:在4個(gè)反應(yīng)體系中分別加入
待測(cè)大豆基因組DNA
待測(cè)大豆基因組DNA
(模板)、相應(yīng)引物、
Taq
Taq
酶、
4種脫氧核苷酸
4種脫氧核苷酸
等,并將PCR儀的溫度設(shè)定為:變性94℃30s、復(fù)性58℃30s、延伸72℃40s,循環(huán)30次。“延伸”的溫度設(shè)定為72℃,是因?yàn)樵摐囟认?
Taq酶活性較高
Taq酶活性較高
。在設(shè)定的PCR體系下可以特異性擴(kuò)增目標(biāo)DNA片段,主要是因?yàn)?
引物與模板DNA的結(jié)合
引物與模板DNA的結(jié)合
具有特異性。
(3)擴(kuò)增產(chǎn)物檢測(cè):可采用
瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳
的方法檢測(cè)。部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2、3所示。據(jù)圖2初步判斷,該大豆為
非轉(zhuǎn)基因
非轉(zhuǎn)基因
(填“轉(zhuǎn)基因”或“非轉(zhuǎn)基因”)大豆。據(jù)圖2、圖3分析,其實(shí)驗(yàn)結(jié)果是
不可信的
不可信的
(填“可信的”或“不可信的”)。

【答案】溶解DNA;二苯胺;序列數(shù)據(jù)庫(kù);CaMV35S的引物設(shè)計(jì)不科學(xué),原因是引物太短、特異性弱,并且兩個(gè)引物之間會(huì)互補(bǔ)結(jié)合;待測(cè)大豆基因組DNA;Taq;4種脫氧核苷酸;Taq酶活性較高;引物與模板DNA的結(jié)合;瓊脂糖凝膠電泳;非轉(zhuǎn)基因;不可信的
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:46引用:1難度:0.5
相似題
  • 1.下列關(guān)于利用洋蔥進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/20 17:30:1組卷:25引用:1難度:0.5
  • 2.下列與DNA相關(guān)實(shí)驗(yàn)的有關(guān)的敘述,錯(cuò)誤的是( ?。?
    選項(xiàng) 實(shí)驗(yàn) 方法/原理
    A 證明DNA半保留復(fù)制 通過(guò)檢測(cè)14N和15N的放射性強(qiáng)度區(qū)分不同的DNA分子
    B DNA的粗提取與鑒定 利用體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精去除部分蛋白質(zhì)
    C DNA片段的PCR擴(kuò)增 PCR反應(yīng)緩沖溶液中的Mg2+能夠激活TaqDNA聚合酶
    D DNA片段的電泳鑒定 在凝膠溶液凝固前加入核酸染料以便對(duì)DNA進(jìn)行染色

    發(fā)布:2024/12/12 12:30:1組卷:16引用:3難度:0.7
  • 菁優(yōu)網(wǎng)3.大腸桿菌經(jīng)溶菌酶和洗滌劑處理后,擬核DNA就會(huì)纏繞在細(xì)胞壁碎片上,靜置一段時(shí)間,質(zhì)粒分布在上清液中,利用上述原理可初步獲得質(zhì)粒DNA。用三種限制酶處理提取的產(chǎn)物,電泳結(jié)果如圖所示。下列關(guān)于質(zhì)粒的粗提取和鑒定的敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/15 19:0:2組卷:72引用:10難度:0.7
小程序二維碼
把好題分享給你的好友吧~~
APP開發(fā)者:深圳市菁優(yōu)智慧教育股份有限公司| 應(yīng)用名稱:菁優(yōu)網(wǎng) | 應(yīng)用版本:5.0.7 |隱私協(xié)議|第三方SDK|用戶服務(wù)條款
本網(wǎng)部分資源來(lái)源于會(huì)員上傳,除本網(wǎng)組織的資源外,版權(quán)歸原作者所有,如有侵犯版權(quán),請(qǐng)立刻和本網(wǎng)聯(lián)系并提供證據(jù),本網(wǎng)將在三個(gè)工作日內(nèi)改正