具有放射性同位素標(biāo)記且具有特定的堿基序列DNA片段,常用作標(biāo)記基因,可以用來對具有相應(yīng)的堿基序列的某個基因在染色體上的位置進(jìn)行定位。某研究人員使用放射性同位素
32P標(biāo)記的脫氧腺苷三磷酸(dATP,dA-P
α~P
β~P
γ)等材料制備了DNA片段甲(單鏈),對A基因在染色體上的位置進(jìn)行了研究,實驗流程的示意圖如圖。
回答下列問題:
(1)該研究人員在制備
32P標(biāo)記的DNA片段甲時,所用dATP的α位磷酸基團(tuán)中的磷必須是
32P,原因是
dATP脫去β、γ位上的兩個磷酸基團(tuán)后,則為腺嘌呤脫氧核苷酸,是合成DNA的原料之一
dATP脫去β、γ位上的兩個磷酸基團(tuán)后,則為腺嘌呤脫氧核苷酸,是合成DNA的原料之一
。
(2)該研究人員以細(xì)胞為材料制備了染色體樣品,在混合操作之前要去除樣品中的RNA分子,目的是
防止RNA分子與染色體DNA的W基因片段發(fā)生雜交
防止RNA分子與染色體DNA的W基因片段發(fā)生雜交
。
(3)為了使片段甲能夠通過堿基互補(bǔ)配對與染色體樣品中的A基因結(jié)合,需要通過某種處理使樣品中的染色體DNA
解旋
解旋
。
(4)假設(shè)該A基因是熒光基因,該研究人員在完成上述實驗的基礎(chǔ)上,把A基因轉(zhuǎn)入了一只小鼠的細(xì)胞內(nèi),如果想要檢測A基因是否在小鼠細(xì)胞內(nèi)表達(dá),就可以用上面的標(biāo)記DNA片段,首先對
轉(zhuǎn)錄
轉(zhuǎn)錄
過程產(chǎn)生的
mRNA
mRNA
進(jìn)行檢測,該實驗過程中用某種酶去除了小鼠細(xì)胞樣品中的DNA,這種酶是
DNA酶
DNA酶
。