為獲得高效產(chǎn)酸的醋酸菌用于果醋制作，某興趣小組以蘋果皮為材料，進(jìn)行實驗，實驗流程如下，回答下列相關(guān)問題：
培養(yǎng)基：米曲汁乙醇碳酸鈣培養(yǎng)基——米曲汁1000mL，CaCO₃10g,95%乙醇30mL（滅菌后加入）。在該培養(yǎng)基上，醋酸菌菌落周圍會形成透明圈。

（1）微生物的培養(yǎng)、分離必須嚴(yán)格無菌操作處理，培養(yǎng)基無菌處理的方法是

高壓蒸汽滅菌

高壓蒸汽滅菌

，培養(yǎng)皿、錐形瓶的無菌處理方法是

干熱滅菌

干熱滅菌

，上述

蘋果皮

蘋果皮

不能進(jìn)行無菌處理。
（2）①過程通常需在

30～35

30～35

℃進(jìn)行

振蕩

振蕩

（填“靜置”或“振蕩”）培養(yǎng)，原因是

醋酸菌為需氧菌，振蕩可增加培養(yǎng)液的溶氧量

醋酸菌為需氧菌，振蕩可增加培養(yǎng)液的溶氧量

。
（3）培養(yǎng)一段時間后，培養(yǎng)液的pH

下降

下降

，原因是

在氧氣充足時，醋酸菌將乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿?/div>

在氧氣充足時，醋酸菌將乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿?/div>。
（4）②過程需采用

稀釋涂布平板法

稀釋涂布平板法

接種，應(yīng)選擇

透明圈大

透明圈大

的菌落作為菌種進(jìn)一步培養(yǎng)。