芽孢桿菌生長(zhǎng)迅速,營(yíng)養(yǎng)要求簡(jiǎn)單,且能形成抗逆性很強(qiáng)的芽孢。某實(shí)驗(yàn)小組欲以黃瓜灰霉病菌作為指示菌,從采集到的土樣中分離芽孢桿菌,并從分離到的芽孢桿菌中篩選高效廣譜拮抗菌(指一種菌能產(chǎn)生某種物質(zhì)抑制另外一種菌的生存),其所需培養(yǎng)基和實(shí)驗(yàn)步驟如下。回答下列問(wèn)題:
(一)培養(yǎng)基
PB培養(yǎng)基:用于病原細(xì)菌的培養(yǎng)和病原細(xì)菌拮抗菌的培養(yǎng)、篩選及保存。
PDA培養(yǎng)基:用于病原真菌的培養(yǎng)和病原真菌拮抗菌的篩選。
(二)實(shí)驗(yàn)步驟
(1)芽孢桿菌的分離和純化
準(zhǔn)確稱取10g土壤樣品,加入到盛有90 mL的無(wú)菌水中,振蕩?kù)o止后再用 無(wú)菌移液器無(wú)菌移液器吸取10mL土壤懸液加到90 mL無(wú)菌水中,充分混勻,即得 102102倍稀釋液,然后以此類推逐步梯度稀釋至適當(dāng)濃度,取合適稀釋度下的菌液,涂布接種于 PBPB固體培養(yǎng)基上。根據(jù)菌落的 大小、形狀、質(zhì)地、顏色、光澤、透明度大小、形狀、質(zhì)地、顏色、光澤、透明度(答三個(gè))等特征,挑取不同形態(tài)的單菌落,作為待測(cè)原始菌株。
(2)拮抗菌的初篩--五點(diǎn)對(duì)峙法
在PDA平板中心接種黃瓜灰霉病菌菌餅,四周等距離接種待篩選芽孢桿菌,25℃恒溫培養(yǎng),每個(gè)篩選實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次,目的是 避免實(shí)驗(yàn)的偶然性,使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更可靠避免實(shí)驗(yàn)的偶然性,使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更可靠。根據(jù) 各篩選菌產(chǎn)生的抑菌圈大小各篩選菌產(chǎn)生的抑菌圈大小比較拮抗能力,從而保留拮抗效果優(yōu)良的菌株。
(3)探究培養(yǎng)時(shí)間對(duì)抗菌物質(zhì)的影響
實(shí)驗(yàn)小組通過(guò)篩選找出了優(yōu)良的芽孢桿菌菌株ch-22,現(xiàn)欲探究培養(yǎng)時(shí)間對(duì)其產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)活性的影響,請(qǐng)簡(jiǎn)要寫出實(shí)驗(yàn)思路:取適量菌株ch-22接種于一定量的富集培養(yǎng)液巾,適宜條件下,分別培養(yǎng)不同時(shí)間(24h、36h、48h、60h、72h、84h……)后,取發(fā)酵液過(guò)濾除菌,采用“五點(diǎn)對(duì)峙法”檢測(cè)不同時(shí)間等量培養(yǎng)液中抗菌物質(zhì)的抑菌效果(培養(yǎng)時(shí)間可改變)取適量菌株ch-22接種于一定量的富集培養(yǎng)液巾,適宜條件下,分別培養(yǎng)不同時(shí)間(24h、36h、48h、60h、72h、84h……)后,取發(fā)酵液過(guò)濾除菌,采用“五點(diǎn)對(duì)峙法”檢測(cè)不同時(shí)間等量培養(yǎng)液中抗菌物質(zhì)的抑菌效果(培養(yǎng)時(shí)間可改變)。
【答案】無(wú)菌移液器;102;PB;大小、形狀、質(zhì)地、顏色、光澤、透明度;避免實(shí)驗(yàn)的偶然性,使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更可靠;各篩選菌產(chǎn)生的抑菌圈大小;取適量菌株ch-22接種于一定量的富集培養(yǎng)液巾,適宜條件下,分別培養(yǎng)不同時(shí)間(24h、36h、48h、60h、72h、84h……)后,取發(fā)酵液過(guò)濾除菌,采用“五點(diǎn)對(duì)峙法”檢測(cè)不同時(shí)間等量培養(yǎng)液中抗菌物質(zhì)的抑菌效果(培養(yǎng)時(shí)間可改變)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:11引用:2難度:0.7
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1.丙草胺(C15H22ClNO2)是一種廣泛應(yīng)用的除草劑,能抑制土壤細(xì)菌、放線菌和真菌的生長(zhǎng)。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株,并對(duì)其計(jì)數(shù)(如圖所示),以期為修復(fù)污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯(cuò)誤的是( )
發(fā)布:2024/12/31 4:0:1組卷:17引用:3難度:0.7 -
2.回答下列關(guān)于微生物的問(wèn)題.
阿拉伯膠是一種多糖,研究者從某地合歡樹(shù)下距離地表深10~15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01,以下為該菌株的鑒定過(guò)程.
(1)為獲得單菌落,可采用平板劃線法或
A.細(xì)胞膜 B.核糖體 C.?dāng)M核 D.莢膜
(2)表中培養(yǎng)液pH均為6.0,若對(duì)SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進(jìn)行測(cè)定,則應(yīng)選用表中的
①缺少
②具有
③缺乏
表 試驗(yàn)用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
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g/LC __ __
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g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發(fā)布:2025/1/2 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.5 -
3.為了防治大氣污染,煙氣脫硫是環(huán)保領(lǐng)域迫切需要解決的問(wèn)題.研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細(xì)菌,并了解其生長(zhǎng)規(guī)律,進(jìn)行了如下操作.請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)采樣與細(xì)菌的篩選:在某熱電廠煙囪周圍區(qū)域要盡量做到
(2)馴化脫硫細(xì)菌:將篩選出的脫硫細(xì)菌接種于有少量無(wú)菌水的三角瓶中,邊攪拌邊持續(xù)通入SO2氣體幾分鐘,然后接種到培養(yǎng)基上,待長(zhǎng)出菌落后再重復(fù)上述步驟,并逐步延長(zhǎng)通SO2的時(shí)間,同時(shí)逐步降低培養(yǎng)基的pH.此操作的目的是分離出
(3)培養(yǎng)與觀察:一般來(lái)說(shuō),在一定的培養(yǎng)條件下(相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時(shí)間),馴化后的脫硫細(xì)菌表現(xiàn)出穩(wěn)定的
(4)探究生長(zhǎng)規(guī)律:在計(jì)數(shù)時(shí),計(jì)數(shù)方法有稀釋涂布平板法和發(fā)布:2025/1/1 8:0:2組卷:6引用:2難度:0.5
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