花青苷可以決定蘋果果皮、果肉等顏色的鮮艷程度，研究人員欲研究BR對花青苷合成的影響及機(jī)制。
（1）BR（油菜素內(nèi)酯）是一種天然植物激素，通過影響細(xì)胞基因的表達(dá)起到

調(diào)節(jié)

調(diào)節(jié)

作用。

（2）A2基因為花青苷合成相關(guān)基因，為探究BR與A2基因之間的關(guān)系，研究者使用BR處理了蘋果幼苗，檢測A2基因的表達(dá)水平結(jié)果如圖1，該結(jié)果表明

BR促進(jìn)A2基因表達(dá)

BR促進(jìn)A2基因表達(dá)

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（3）有人提出A2蛋白和R1蛋白會影響花青苷合成酶ANS基因啟動子的活性。研究者通過檢測熒光素酶的表達(dá)量來驗證此推測，進(jìn)行了相關(guān)研究。
①構(gòu)建表達(dá)載體：請將選項的序號或字母填入圖2相應(yīng)的方框中。
啟動子：
Ⅰ．A2基因啟動子
Ⅱ．R1基因啟動子
Ⅲ．ANS基因啟動子
Ⅳ．熒光素酶基因啟動子
Ⅴ．常規(guī)啟動子
基因：
A．A2基因
B．R1基因
C．ANS基因
D．熒光素酶基因
②導(dǎo)入受體細(xì)胞：構(gòu)建好的表達(dá)載體通過

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化/基因槍法

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化/基因槍法

法導(dǎo)入蘋果愈傷組織。
③實驗結(jié)果檢測：實驗結(jié)果如圖3，結(jié)果表明

單獨的A2蛋白抑制ANS基因轉(zhuǎn)錄，A2和R1蛋白都存在時抑制ANS基因轉(zhuǎn)錄效果更強(qiáng)（單獨R1無顯著影響）

單獨的A2蛋白抑制ANS基因轉(zhuǎn)錄，A2和R1蛋白都存在時抑制ANS基因轉(zhuǎn)錄效果更強(qiáng)（單獨R1無顯著影響）

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（4）雙分子熒光互補技術(shù)可研究細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)之間是否相互作用。將黃色熒光蛋白基因分為2段（片段1與片段2），分別與可特異性結(jié)合的兩種蛋白的基因融合構(gòu)建表達(dá)載體，將兩種載體同時導(dǎo)入受體細(xì)胞，在515nm激發(fā)光下可發(fā)出黃色熒光。研究者推測A2蛋白和R1蛋白在細(xì)胞內(nèi)形成復(fù)合物發(fā)揮作用，進(jìn)行如圖4操作，請寫出可驗證此推測的實驗現(xiàn)象。

實驗過程	實驗現(xiàn)象
載體組成	出現(xiàn)黃色熒光 出現(xiàn)黃色熒光
	沒有黃色熒光 沒有黃色熒光

（5）綜合以上研究結(jié)果，闡述BR對花青苷合成影響的作用機(jī)制

BR促進(jìn)A2基因表達(dá)，A2蛋白增多，與R1蛋白形成復(fù)合物，作用于ANS基因的啟動子，抑制其轉(zhuǎn)錄，抑制花青苷的合成

BR促進(jìn)A2基因表達(dá)，A2蛋白增多，與R1蛋白形成復(fù)合物，作用于ANS基因的啟動子，抑制其轉(zhuǎn)錄，抑制花青苷的合成

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