R-7是家蠶體內(nèi)的一種小分子非編碼RNA，可與某些mRNA尾端的一段非編碼序列（3′-UTR）結(jié)合，進而影響基因的表達。為研究R-7是否影響家蠶基因B（調(diào)控家蠶眼睛發(fā)育）的表達，科研人員將基因B中對應(yīng)3′-UTR的DNA片段與熒光素酶基因（該基因的表達不受R-7的影響）重組如甲圖所示，將該重組載體導(dǎo)入家蠶胚胎細胞并觀察其表達，結(jié)果如乙圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

（1）要想短時間內(nèi)獲得大量目的基因需用到的技術(shù)是

PCR

PCR

，該技術(shù)的原理是

該基因的一段核苷酸序列

該基因的一段核苷酸序列

。若一個含目的基因的DNA擴增n代，則共需消耗

2ⁿ-1

2ⁿ-1

對引物。
（2）圖甲中對應(yīng)3'-UTR的DNA片段應(yīng)插入到位點

2

2

，原因是

目的基因應(yīng)插入到啟動子與終止子之間，且不能破壞熒光素酶基因

目的基因應(yīng)插入到啟動子與終止子之間，且不能破壞熒光素酶基因

。基因工程的核心步驟是

基因表達載體的構(gòu)建

基因表達載體的構(gòu)建

，其目的是

使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并可以遺傳給下一代，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用

使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并可以遺傳給下一代，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用

。
（3）科研人員從乙圖所示的實驗組和對照組細胞中提取蛋白質(zhì)，經(jīng)處理檢測后獲得相對熒光值（在適宜條件下，熒光素酶可催化熒光素發(fā)生氧化反應(yīng)并發(fā)出熒光）。實驗組為將重組載體導(dǎo)入含R-7的家蠶胚胎細胞中，對照組1為將含有熒光素酶基因的表達載體（不含對應(yīng)3′-UTR的DNA片段）導(dǎo)入含R-7的家蠶胚胎細胞中，則對照組2應(yīng)為

將重組載體導(dǎo)入不含（或去除）R-7的家蠶胚胎細胞中

將重組載體導(dǎo)入不含（或去除）R-7的家蠶胚胎細胞中

。由結(jié)果推知R-7通過

與基因B所轉(zhuǎn)錄的mRNA的3'-UTR結(jié)合

與基因B所轉(zhuǎn)錄的mRNA的3'-UTR結(jié)合

進而抑制基因B的表達。