將蘇云金芽孢桿菌Bt蛋白的基因導入棉花細胞中,可獲得抗棉鈴蟲的轉基因棉,其過程如圖所示(注:農桿菌中Ti質粒上只有T-DNA片段能轉移到植物細胞中)。
(1)通過從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增或 人工化學合成人工化學合成等方法,都可獲取目的基因。
(2)過程①需用同種限制性核酸內切酶對含Bt基因的DNA和Ti質粒進行酶切,使二者的兩端形成 相同的黏性末端相同的黏性末端。為將過程②獲得的含重組質粒的農桿菌篩選出來,應使用添加含 卡那霉素卡那霉素的培養(yǎng)基。
(3)過程③中將棉花細胞與農桿菌混合后共同培養(yǎng),旨在讓 T-DNAT-DNA進入棉花細胞。將目的基因導入植物細胞的方法除題中所述外,還可采用 基因槍法/花粉管通道法基因槍法/花粉管通道法(寫出一種即可)。
(4)從棉花細胞到試管苗運用的技術原理是 植物細胞具有全能性植物細胞具有全能性。
(5)培育轉基因棉的基本原理是讓Bt蛋白的基因在棉花細胞中 穩(wěn)定和高效的表達穩(wěn)定和高效的表達,為檢驗其是否成功,常用的方法是 讓棉鈴蟲攝入該葉片,觀察其存活情況讓棉鈴蟲攝入該葉片,觀察其存活情況。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】人工化學合成;相同的黏性末端;卡那霉素;T-DNA;基因槍法/花粉管通道法;植物細胞具有全能性;穩(wěn)定和高效的表達;讓棉鈴蟲攝入該葉片,觀察其存活情況
【解答】
【點評】
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