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基因工程的相關(guān)技術(shù)可用于病毒檢測(cè),也可用于制備疫苗。利用熒光PCR技術(shù)檢測(cè)是否感染某種RNA病毒時(shí),基本操作流程為:提取病毒的RNA→熒光PCR擴(kuò)增反轉(zhuǎn)錄DNA→熒光檢測(cè)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)分離病毒的RNA通常在冰浴條件下進(jìn)行,目的是抑制
RNA酶
RNA酶
的活性,防止病毒的RNA降解。熒光PCR反應(yīng)體系中需要加入的酶和原料是
反轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶和4種脫氧核苷酸
反轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶和4種脫氧核苷酸
。為保證反應(yīng)體系只擴(kuò)增病毒特異性核酸序列,應(yīng)先根據(jù)病毒的特異性核酸序列設(shè)計(jì)
2種引物
2種引物
。
(2)熒光染料能摻入DNA雙鏈中發(fā)出熒光,在游離狀態(tài)下不發(fā)出熒光。若檢測(cè)到熒光量達(dá)到某個(gè)臨界值,則代表陽(yáng)性,說(shuō)明
樣本中含有病毒的RNA
樣本中含有病毒的RNA
。若檢測(cè)出現(xiàn)“假陰性”現(xiàn)象,原因可能是
病毒的RNA在提取過(guò)程中發(fā)生降解
病毒的RNA在提取過(guò)程中發(fā)生降解

(3)某病毒的E蛋白和P蛋白會(huì)引起機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)。構(gòu)建重組活病毒載體疫苗時(shí),獲取某病毒的
E基因和P基因
E基因和P基因
插入腺病毒的基因組中。通過(guò)重組腺病毒感染動(dòng)物可使其獲得免疫力,原因是
重組腺病毒在動(dòng)物體內(nèi)表達(dá)E蛋白和P蛋白,刺激動(dòng)物產(chǎn)生特異性抗體和記憶細(xì)胞
重組腺病毒在動(dòng)物體內(nèi)表達(dá)E蛋白和P蛋白,刺激動(dòng)物產(chǎn)生特異性抗體和記憶細(xì)胞

【答案】RNA酶;反轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶和4種脫氧核苷酸;2種引物;樣本中含有病毒的RNA;病毒的RNA在提取過(guò)程中發(fā)生降解;E基因和P基因;重組腺病毒在動(dòng)物體內(nèi)表達(dá)E蛋白和P蛋白,刺激動(dòng)物產(chǎn)生特異性抗體和記憶細(xì)胞
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:22引用:2難度:0.7
相似題
  • 1.為了對(duì)重金屬污染的土壤進(jìn)行生物修復(fù),研究者將從楊樹(shù)中克隆的重金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(HMA3)基因與外源高效啟動(dòng)子連接,導(dǎo)入楊樹(shù)基因組中(如圖)。為檢測(cè)獲得的轉(zhuǎn)基因楊樹(shù)苗中是否含有導(dǎo)入的HMA3基因,同時(shí)避免內(nèi)源HMA3基因的干擾,并成功獲得大量的重組基因,在進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí),下列說(shuō)法正確的是(  )
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    發(fā)布:2024/11/13 5:0:1組卷:22引用:1難度:0.5
  • 2.循環(huán)閾值(Ct值)是通過(guò)一定的技術(shù)手段,使病毒的擴(kuò)增產(chǎn)物達(dá)到可檢測(cè)水平所需的循環(huán)次數(shù)。新冠肺炎診療方案(第九版)把感染者出院標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定為兩次核酸檢測(cè)Ct值均>35。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/13 7:30:1組卷:10引用:4難度:0.7
  • 3.新冠病毒為RNA病毒,其表面的S蛋白能刺激人體產(chǎn)生中和抗體。CHO-GS細(xì)胞是生產(chǎn)S蛋白的工程細(xì)胞,該細(xì)胞缺少谷氨酰胺合成酶基因(GS基因),在缺少谷氨酰胺的基本培養(yǎng)基上不能生長(zhǎng)。回答下列問(wèn)題:
    (1)以新冠病毒的RNA為模板,通過(guò)RT-PCR獲取S基因(DNA)時(shí)需要特異性的引物,該引物的作用是
     
    ,RT-PCR過(guò)程所需的酶主要有
     
    。
    (2)構(gòu)建目的基因表達(dá)載體時(shí),在啟動(dòng)子和終止子間需要插入S基因和
     
    基因,篩選含S基因的CHO-GS細(xì)胞時(shí)所用的選擇培養(yǎng)基為
     

    (3)用CHO-GS細(xì)胞生產(chǎn)S蛋白時(shí),除培養(yǎng)基成分外,影響細(xì)胞生長(zhǎng)和S蛋白表達(dá)的環(huán)境條件還有
     
    。經(jīng)分離提純后的S蛋白可用于
     

    發(fā)布:2024/11/11 8:30:2組卷:10引用:4難度:0.6
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