基因工程的相關技術可用于病毒檢測,也可用于制備疫苗。利用熒光PCR技術檢測是否感染某種RNA病毒時,基本操作流程為:提取病毒的RNA→熒光PCR擴增反轉錄DNA→熒光檢測。請回答下列問題:
(1)分離病毒的RNA通常在冰浴條件下進行,目的是抑制RNA酶RNA酶的活性,防止病毒的RNA降解。熒光PCR反應體系中需要加入的酶和原料是反轉錄酶、Taq酶和4種脫氧核苷酸反轉錄酶、Taq酶和4種脫氧核苷酸。為保證反應體系只擴增病毒特異性核酸序列,應先根據(jù)病毒的特異性核酸序列設計2種引物2種引物。
(2)熒光染料能摻入DNA雙鏈中發(fā)出熒光,在游離狀態(tài)下不發(fā)出熒光。若檢測到熒光量達到某個臨界值,則代表陽性,說明樣本中含有病毒的RNA樣本中含有病毒的RNA。若檢測出現(xiàn)“假陰性”現(xiàn)象,原因可能是病毒的RNA在提取過程中發(fā)生降解病毒的RNA在提取過程中發(fā)生降解。
(3)某病毒的E蛋白和P蛋白會引起機體產生特異性免疫反應。構建重組活病毒載體疫苗時,獲取某病毒的E基因和P基因E基因和P基因插入腺病毒的基因組中。通過重組腺病毒感染動物可使其獲得免疫力,原因是重組腺病毒在動物體內表達E蛋白和P蛋白,刺激動物產生特異性抗體和記憶細胞重組腺病毒在動物體內表達E蛋白和P蛋白,刺激動物產生特異性抗體和記憶細胞。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】RNA酶;反轉錄酶、Taq酶和4種脫氧核苷酸;2種引物;樣本中含有病毒的RNA;病毒的RNA在提取過程中發(fā)生降解;E基因和P基因;重組腺病毒在動物體內表達E蛋白和P蛋白,刺激動物產生特異性抗體和記憶細胞
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:22引用:2難度:0.7
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